賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀介紹

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能的PCR檢測儀器，專為基因表達研究、基因分型、拷貝數變異分析、突變檢測等實驗需求而設計。作為分子生物學研究中廣泛應用的儀器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高靈敏度、強大的多重檢測能力以及快速熱循環技術，在科研、臨床和工業檢測領域表現出色。

一、儀器概述

LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀結合了先進的光學檢測系統與快速溫控技術，是一款為高精確度核酸定量分析而設計的設備。該儀器支持96孔和384孔反應板，能夠適應不同規模的實驗需求，同時以其出色的熒光檢測能力和數據分析功能，為分子生物學研究提供了可靠的技術平臺。

這款設備可以實時監測PCR擴增過程中熒光信號的變化，幫助研究人員動態、定量分析目標基因的表達或突變狀態。無論是基礎研究還是臨床診斷，LightCycler® 480 II都能夠為科學家提供高效、穩定和可靠的數據支持。

二、技術特點

1. 高性能光學檢測系統

LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學模塊，支持多通道熒光檢測，可對多個目標基因進行同時監測。

• 高靈敏度檢測：適合低豐度基因的分析，可靈敏檢測低拷貝數樣本。

• 多通道支持：支持多達5種熒光染料的同時檢測，適合多重PCR實驗。

• 熒光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見熒光標記物。

2. 快速熱循環技術

LightCycler® 480 II采用高效熱循環模塊，能夠快速升溫和降溫，大幅度縮短PCR實驗時間，提高檢測效率。

• 快速反應速度：每次實驗的反應時間顯著縮短，同時保持較高的擴增效率。

• 精確溫控系統：溫控精度達到±0.1°C，確保PCR擴增的高穩定性和重復性。

3. 多通量配置

該儀器支持兩種孔板配置，滿足不同實驗室規模需求：

• 96孔板：適合中等規模實驗和科研使用。

• 384孔板：為高通量實驗設計，支持大規模篩查和復雜檢測。

4. 智能數據分析

LightCycler® 480 II配備功能全面的數據分析軟件，能夠滿足用戶的多樣化數據處理需求。

• Ct值分析：快速、準確地識別循環閾值（Ct值），提供可靠的擴增曲線。

• 熔解曲線分析：用于擴增反應的特異性驗證，幫助識別非特異性產物或污染。

• 絕對與相對定量：支持基于標準曲線的絕對定量以及2^-ΔΔCt法的相對定量分析。

• 突變檢測和基因分型：支持高分辨率熔解曲線（HRM）分析，用于基因突變檢測和基因分型研究。

5. 靈活性與兼容性

LightCycler® 480 II儀器設計靈活，適應多種實驗類型和需求：

• 多種反應模式：支持標準PCR、實時定量PCR、多重PCR、熔解曲線分析等。

• 兼容不同實驗條件：支持多種熒光標記體系和反應方案。

• 自動化擴展：可與實驗室自動化設備集成，進一步提高實驗效率。

三、核心功能

1. 基因表達分析

LightCycler® 480 II能夠實時監控基因表達水平的變化，適用于各種基因表達研究場景。

• 相對定量：對樣本間基因表達水平差異進行分析。

• 絕對定量：通過標準曲線直接計算基因拷貝數。

2. 突變檢測

該儀器可以靈敏檢測低頻率突變，適用于點突變、插入/缺失突變等多種基因突變類型的研究。

• HRM分析：高分辨率熔解曲線技術能夠高效區分樣本中的突變和野生型序列。

• 單核苷酸多態性（SNP）檢測：快速準確識別樣本中的特定基因變異。

3. 基因分型

LightCycler® 480 II支持基因分型實驗，通過分析熒光信號，對樣本進行遺傳多態性分型。

4. 拷貝數變異（CNV）分析

通過定量PCR實驗，該儀器能夠檢測基因組中目標基因的拷貝數變化，幫助研究拷貝數擴增或缺失的基因。

5. 病毒載量檢測

LightCycler® 480 II被廣泛應用于病毒載量分析，通過定量檢測病毒核酸，監測感染狀況和治療效果。

四、技術參數

以下為LightCycler® 480 II的主要技術參數：

五、儀器優勢

1. 高靈敏度與高通量

LightCycler® 480 II具檢測靈敏度和高通量能力，可同時處理大批量樣本，顯著提高實驗效率。

2. 多功能性

該儀器支持多種實驗類型，包括基因表達分析、基因分型、突變檢測和拷貝數分析等，覆蓋了絕大多數PCR應用場景。

3. 操作簡便

儀器的設計注重用戶體驗，配套軟件界面直觀，實驗設置和數據分析簡便易用。

4. 實驗結果可靠

高精度的溫控系統和靈敏的光學模塊確保了實驗結果的準確性和可重復性。

5. 靈活的擴展能力

兼容多種耗材和反應方案，支持與自動化工作站集成，適應不同實驗室的需求。

六、應用領域

LightCycler® 480 II在多個領域得到了廣泛應用：

1. 基礎研究

• 基因表達調控研究

• 基因功能研究

• 遺傳多樣性分析

2. 醫學研究

• 腫瘤標志物檢測

• 遺傳疾病相關基因分析

• 病毒載量檢測和病原體定量

3. 藥物開發

• 藥物基因組學研究

• 個體化醫療相關基因研究

• 藥物代謝相關基因分型

4. 工業檢測

• 食品安全檢測中的病原體分析

• 環境樣本中的微生物檢測

七、總結

賽默飛LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度、多通道檢測、快速熱循環技術和強大的數據分析能力，成為分子生物學和基因組學研究中的重要工具。它不僅能夠滿足基礎科研需求，還在臨床和工業檢測領域發揮了重要作用。

無論是小規模實驗還是大規模高通量篩查，LightCycler® 480 II都能夠為用戶提供可靠的結果和高效的實驗體驗，為基因研究和診斷提供全面的技術支持。