如何減少血清沉淀物的產生?
公司以*產品為標準,自主研究開發了一系列應用于分子生物學、蛋白質學、免疫學研究的相關產品,全面完善了生產流程和產品質量控制體系,同時利用自身的優勢不斷整合國內外資源,逐步擴大產品種類和范圍,代理了美國R&D、RB、BD、GBD、DSL、BIOO等品牌的ELISA試劑盒,力爭成為生物技術和食品安全檢測領域zui的產品供應商
我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:·解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。·解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生·請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。·血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。·若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
提醒你注意一下,細胞復蘇是速度一定要快,尤其是在-5℃~0℃這階段,因為在這個溫度階段細胞zui容易受損,如果復蘇的步驟正確,細胞仍然仍然可以生長,細胞活性損失也不是太大。細胞復蘇的步驟是:一、準備一個1,000ml的燒杯,放入大概三分之二的37℃的溫水。二、從液氮中取出凍存管,迅速放入溫水中震蕩,盡可能在短時間內使其中的物質融化。三、將凍存管中的細胞懸液轉移到離心管中,然后在1,000轉/分鐘離心10分鐘,棄去上清液。四、在細胞培養瓶中加入培養液,然后把細胞放入培養瓶中,放入37℃溫箱中培養。經過以上步驟,如果沒有什么特殊情況細胞是可以生長的。
可以參考有關細胞培養技術方面的書籍,里面有很多的經典方法.我個人的經驗是凍存時細胞密度大概要求5x106/ml以上,如果細胞凍存時間只要求半年到一年而已,我建議你用-80度的冰箱即可,以免時不時需補充氮氣.另細胞復蘇時一般書籍推薦用37℃的水浴箱,我用的大概是40℃,因為打開蓋子時溫度即降,此時能使凍存細胞更好的在半分鐘至一分中內解凍。將含凍存液的細胞移至離心管,加入4倍的培養基,500轉/分鐘離心10分鐘,棄上清。用培養基調細胞密度,接種至培養瓶或所需的培養板中培養.
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我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:·解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。·解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生·請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。·血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。·若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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