用人血清進(jìn)行噬菌體ElISA

來源：上海寶葉生物科技有限公司 2012年09月18日 08:58

[器材和試劑]

● 包被緩沖液

● PBST

● PBBST[PBS，1％TritonX—100，3％ BSA（Sigma）]

● 兔抗人Fc—特異性IgG（Pierce）：用包被緩沖液稀釋為5．0ug/ml①

● HRP標(biāo)記的抗噬菌體抗體（Amersham Biosciences）：用封閉液以1/10000比例稀釋

● 顯色液[3，3’，5，5’—四甲基聯(lián)苯胺（TMB）液體底物系統(tǒng)，Sigma]

[方法]

1．將200ul兔抗人Fc—特異性IgG等量分加到各孔中。4℃孵育過夜。

2．用PBST洗滌多孔板。

3．加250ul PBBST。37℃孵育2小時(shí)。

4．棄去PBBST，將200ul噬菌體上清等量加入各孔。每孔中加入0．25ul血清，37℃振蕩孵育60分鐘。

5，用PBST洗滌板孔。

6．加200gl HRP標(biāo)記的羊抗噬菌體抗體。37℃振蕩孵育30分鐘。

7．用PBST洗滌板孔。

8．每孔中加200ul顯色液。室溫避光孵育15分鐘。加25ul 2mol/L H2S04終止反應(yīng)。分析前在酶標(biāo)儀中振蕩10秒。

9．用自動(dòng)酶標(biāo)儀將A₄₀₅和A₆₅₅間的差值作為結(jié)果記錄。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线