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西美杰代理舟帆生物IEC-HPLC通用流動相

前言

離子交換色譜法是一種重要的生物化學分離技術，它基于帶電分子與固定相之間的相互作用，廣泛應用于蛋白質分析，使得通過酸堿變體推導蛋白相關降解途徑成為可能，并為相關的質量控制和分子優化提供指導數據。而在蛋白質分析過程中，離子交換色譜法方法開發是非常困難的,這受困于每個蛋白的空間結構和氨基酸排列截然不同，這種跳躍式的變化使得每種蛋白擁有不同的等電點與唾液酸或糖基化程度，這大大增加相關方法開發的困難程度，此開發的關鍵步驟包括多步：選擇合適的離子交換介質、優化緩沖體系、確定洗脫條件、調整流速和柱溫等。這些步驟確保了離子交換色譜法在蛋白質分析中的有效性和可靠性，但繁瑣的方法開發步驟也為試驗帶來極大的時間成本，間接的增加投入成本，且伴隨著方法開發失敗的風險，這成為蛋白藥物分析領域迫在眉睫的問題。舟帆生物已經開發出關于離子交換色譜法的通用流動相，并取得了令人鼓舞的進展。

由于樣品中各組分的電荷性質、大小、形狀和疏水性等都會影響離子交換色譜的過程和結果，選擇合適的離子交換介質和緩沖體系尤為重要。離子強度、pH值、溫度和流速等色譜條件的優化需要通過實驗來確定，并且離子交換色譜法中離子強度和pH值的微小變化都可能導致分離效果的顯著差異。在日常配制關于離子交換色譜法流動相時精確控制這些參數是實現穩定和重復性分離的關鍵。然而，在實際操作中，由于緩沖液的制備和使用過程可能會引入誤差，通常導致色譜峰保留時間的遷移等問題。為了解決上述問題，舟帆生物自主開發并優化出了一款用于離子交換色譜法的通用流動相，該產品綜合考慮了分析成本和時間效率，在離子色譜方法開發過程中兼具了分離效率、分析時間和成本，提供了一種高效、經濟且通用的離子交換色譜流動相的選擇。

實驗中用到的樣品包括8個蛋白藥物樣品均來自合作方浙江大學藥學院生物藥制劑與分析團隊。

下表列出了使用ZF-LC-0002流動相A&B（10×）進行IEC-HPLC液相分析的色譜參數：

將8種蛋白稀釋到1mg/mL,并使用CpB酶酶切，酶切后的樣品10000 rmp/min離心十分鐘取上清液進樣檢測。

見圖1。

開發出一種離子交換色譜法通用的流動相，在8種蛋白藥物樣品的分析中使用簡單的洗脫條件即可對蛋白分子的酸性變體和堿性變體達到較好的分離，為離子交換色譜法相關的方法開發提供了一項優異選項，可以為企業和相關研究單位大大縮短方法開發時間和投入。

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