目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質研究>>蛋白質定量>> PC00222,2-聯喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
| CAS | 979-88-4 | 純度 | ≥98% |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 388.28 | 分子式 | C20H10N2Na2O4· xH2O |
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1g |
| 貨號 | PC0022 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油,能源 |
| 主要用途 | 蛋白定量 |
2,2-聯喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
貨號：PC0022
規格：1g/瓶
說明： 蛋白定量
有效期 1年
英文名稱 BCA
CAS 979-88-4
分子式 C20H10N2Na2O4· xH2O
分子量 388.28
儲存條件 2-8℃
純度 Purity≥98%
外觀（性狀） 白色淡黃色粉末
單位 瓶
蛋白定量
產品簡介：
堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結果，但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明：
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液：根據標準品和樣品數量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內穩定。
2. 稀釋標準品：取10μL BSA標準品用PBS稀釋100μL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。將標準品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標準品孔中，加PBS補足20μL。
3. 將樣品作適當稀釋（多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大，標準線前面的點可能不很準確，所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm，根據標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時，應注意防止因水分蒸發影響檢測結果。
二. 分光光度計法 如沒有酶標儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下：
1. 配制工作液: 根據標準品和樣品數量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內穩定。
2. 稀釋標準品：取100μL BSA標準品用PBS稀釋1mL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支（或者更多）5mL離心管，標上號，按下表加入試劑。
參考文獻：
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《Isoquercitrin, a flavonoid glucoside, exerts a positive effect on osteogenesis in vitro and in vivo》 作者:JingLiabXuxiaWangacYingziWangabChengyanLudDehuaZhengabJunZhangab 期刊:Chemico-Biological Interactions 影響因子:3.296 PMID:30365939
2,2-聯喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA蛋白定量
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