目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>三羧酸循環系列>> BC2150-50T/48S檸檬酸(CA)含量測試盒 三羧酸循環
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/48樣 |
貨號 | BC2150 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 檸檬酸(CA)含量測試 |
檸檬酸(CA)含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC2150
規格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體0.2 mL×1支 | -20℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2瓶 | 常溫保存 |
試劑五 | 液體6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:為易揮發試劑,用完后盡快密封,-20℃保存;
試劑四:臨用前取1瓶加入3 mL試劑一,充分溶解,用不完的試劑2-8℃保存一周。
標準品:2 μmol/mL檸檬酸標準液。
產品說明:
CA是生物體內常見的有機酸,是重要的食品風味物質。此外,CA是三羧酸循環第一步反應的產物。
酸性條件下,檸檬酸還原Cr6+生成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過測定545nm吸光值的增加,即可計算出樣本中檸檬酸含量。
技術指標:
低檢出限:0.02 μmol/mL
線性范圍:0.032-4 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項:
1、樣本處理等過程均需要在冰上進行。
2、試劑五為易致癌物質,實驗過程中,需佩戴手套,避免試劑五濺到皮膚上。
3、檸檬酸試劑一不能用于蛋白含量測定,如需測定蛋白含量,需另取組織進行測定。
4、若反應30min后有明顯的黑色小顆粒,屬于正常現象,需將樣本稀釋后再測。
5、如果樣本吸光值大于0.5,建議將樣本用試劑一稀釋后進行測定。
實驗實例:
取0.1065g 竹子葉片加入1mL試劑一,冰上充分研磨,11000g,4℃離心10min,取上清液按照測定步驟操作,測并計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.281-0.130=0.151,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.438-0.130=0.308,
按樣本質量計算得:
檸檬酸含量(μmol/g 質量)=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W =9.21 μmol/g 質量。
取0.1094g兔腎臟組織加入1mL試劑一,冰上充分研磨,11000g,4℃離心10min,取上清液按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.440-0.130=0.310,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.438-0.130=0.308,按樣本質量計算得:
檸檬酸含量(μmol/g 質量)=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W =18.40 μmol/g 質量。
取0.1mL兔血清加試劑一0.9mL,充分混勻,11000g,4℃離心10min,取上清液按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.271-0.130=0.141,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.438-0.130=0.308,按液體樣本的體積計算:
檸檬酸含量(μmol/mL)=20×ΔA測定÷ΔA標準=9.156 μmol/mL。
相關發表文獻:
Meixi Peng,Dan Yang,Yixuan Hou,et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease.March 2019;(IF5.959)
Luo M,Luo Y, Mao N,et al. Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication. Cellular Physiology and Biochemistry. November 2018;
Zhou Z, Duan Y, Zhou M. Carbendazim‐resistance associated β2‐tubulin substitutions increase deoxynivalenol biosynthesis by reducing the interaction between β2‐tubulin and IDH3 in Fusarium graminearum[J]. Environmental microbiology, 2019.
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