T4 DNA 連接酶 T4 DNA Ligase南京賽泓瑞優質試劑之一，*，質量保證 。

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T4 DNA 連接酶產品介紹
     是從表達基因的大腸桿菌經誘導表后分離純化而來的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結合反應。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接，修復雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。 

T4 DNA 連接酶產品特點
    1. 粘性末端或平末羰雙鏈DNA的連接。
    2. 雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接。
    3. 雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復。
    4. 連接酶介導的RNA檢測。
    5. 位點特異性突變。
    6. 擴增片段長度多態性。 

產品儲存
    -20℃保存 
 

T4 DNA 連接酶活性定義

    1個Weiss活性單位是指在ATP-PPi交換反應中，37°C、20分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量。

保存緩沖液

    20mM Tris-HCL (PH7.5)，1mM DTT，50Mm KCL，0.1mM EDTA，50%甘油  10×Ligation Buffer  400mM Tris-HCL，100mM MgCl2，100mM DTT，5mM ATP(PH7.8，25°C)

    NEB    10,000 units    M0202V
    NEB    100,000 units    M0202L
    NEB    20,000 units    M0202S
, high conc. (2,000,000 units/ml)    NEB    100,000 units    M0202M
, high conc. (2,000,000 units/ml)    NEB    20,000 units    M0202T
T4 Gene 32 Protein    NEB    500 µg    M0300L
T4 Gene 32 Protein    NEB    100 µg    M0300S
T4 PDG (T4 Endonuclease V)    NEB    10,000 units    M0308L
T4 PDG (T4 Endonuclease V)    NEB    2,000 units    M0308S
T4 Polynucleotide Kinase    NEB    250 units    M0201V
T4 Polynucleotide Kinase    NEB    2,500 units    M0201L
T4 Polynucleotide Kinase    NEB    500 units    M0201S
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus)    NEB    1,000 units    M0236L
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus)    NEB    200 units    M0236S
T7 Endonuclease I    NEB    1,250 units    M0302L
T7 Endonuclease I    NEB    250 units    M0302S
T7 Exonuclease    NEB    5,000 units    M0263L
T7 Exonuclease    NEB    1,000 units    M0263S
Taq DNA Ligase    NEB    1,000 units    M0208V
Taq DNA Ligase    NEB    10,000 units    M0208L
Taq DNA Ligase    NEB    2,000 units    M0208S
TaqI Methylase    NEB    5,000 units    M0219L
TaqI Methylase    NEB    1,000 units    M0219S
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase    NEB    1,250 units    M0296L
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase    NEB    250 units    M0296S
Tma Endonuclease III    NEB    2,500 units    M0291L
Tma Endonuclease III    NEB    500 units    M0291S
Topoisomerase I (E. coli)    NEB    500 units    M0301L
Topoisomerase I (E. coli)    NEB    100 units    M0301S
Tth Endonuclease IV    NEB    2,500 units    M0294L
Tth Endonuclease IV    NEB    500 units    M0294S
Tth RecA    NEB    100 µg    M2402S
Universal USER Cassette    NEB    50 pmol    N5504S
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI)    NEB    1,000 units    M0281L
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI)    NEB    200 units    M0281S
Uracil-DNA Glycosylase (UDG)    NEB    500 units    M0280V
Uracil-DNA Glycosylase (UDG)    NEB    5,000 units    M0280L
Uracil-DNA Glycosylase (UDG)    NEB    1,000 units    M0280S
USER Enzyme    NEB    250 units    M5505L
USER Enzyme    NEB    50 units    M5505S
β-Agarase I    NEB    500 units    M0392L
β-Agarase I    NEB    100 units    M0392S
    Promega    100U    M1801
    Promega    500U    M1804

 即T4 DNA連接酶，可以催化粘端或平端雙鏈DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之間以磷酸二酯鍵結合，該催化反應需ATP作為輔助因子。同時T4 DNA連接酶可以修補雙鏈DNA、雙鏈RNA或DNA/RNA雜合物上的單鏈缺刻(single-strand nicks)。
    用途：常用于DNA 和載體、linker或adaptor等的連接。也可以用于缺刻修復及Ligase介導的RNA檢測。
    來源：本由大腸桿菌表達，表達基因的來源為T4嗜菌體。
    活性定義：One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM(300 μg/ml)。200U等于1個Weiss unit，以Weiss unit計，本產品共1000單位。
    純度：不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，滿足常規連接反應要求。
    酶儲存溶液：20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50%(v/v)glycerol。
    10X Ligation Buffer：400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
    失活或抑制：65℃孵育10分鐘可以導致失活；NaCl或KCl濃度大于200mM時強烈抑制。
包裝清單：
產品編號
產品名稱
包裝
D7008-1
(1000U/μl)
200,000U
D7008-2
10X Ligation Buffer
1.5ml
－
說明書
1份
保存條件：
    -20℃保存。
注意事項： 
    對于普通的轉化大腸桿菌的操作，不必對連接產物進行純化，連接產物可以直接用于轉化。但用電轉方法轉化大腸桿菌時，通常宜先用DNA純化試劑盒或酚氯仿抽提方法等純化DNA，然后再進行電轉。
    需進行平端連接或快速連接時，*使用碧云天的快速DNA連接試劑盒(D7002/D7003)。可以進行平端連接，但效率較低。
    普通的連接反應不必進行凝膠電泳觀察。如果需要對于連接產物進行凝膠電泳觀察，*先在65℃孵育10分鐘使失活，以避免和DNA結合導致的條帶位置遷移(band shift)。
    為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

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