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Anti-UBE2D2 Antibo

產品分類：蛋白電泳

儲存條件：4℃,避光,12個月

用途：配制丙烯酰胺凝膠(PAGE膠),包括SDS-PAGE膠等,可以用于蛋白或核酸的分離。丙烯酰胺:亞甲基雙丙烯酰胺溶液(30%Acr-Bis,29:1)

注意事項：主要由超純丙烯酰胺(acrylamide):亞甲基雙丙烯酰胺(bisacrylamide)組成,其比例為29:1。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

松口蘑絲/蘇激蛋白Pim1抗體Anti-CDH3 Antibody胰島樣生長因子Ⅰ受體(IGF-ⅠR)

蠟狀芽孢桿菌磷化前病整合位點蛋白1抗體Anti-CDH4 Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF-R1)

果生核盤菌肽基脯酞順反異構Pinl抗體Anti-CDH3 Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF-1R)

產氣莢膜梭菌 E型磷化肽基脯酞順反異構Pinl抗體Anti-CDH5 Antibody血小板內皮粘附分子-1(PECAM-1/CD31)

巴西固氮螺菌磷化孕激受體抗體Anti-CDK1 Antibody血小板內皮粘附分子1(PECAM1)

解鳥克雷伯氏菌磷化磷脂酰肌激（PI3Kβ）抗體Anti-CDK1 Antibody(PB0561)血小板/內皮粘附分子-1(PECAM-1/CD31)

黑腐皮殼菌磷化蛋白磷2A（PP2Aα）抗體Anti-CDK2 Antibody(PB0562)血小板/內皮粘附分子1(PECAM1)

葡萄酒色被孢霉絲/蘇蛋白激5抗體Anti-CDK2 Antibody血漿炎性趨化因子(CXCL9/MIG)

大腸埃希菌蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體Anti-CDK5 Antibody胸腺活化調節趨化因子(TAFA/CCL17)

鏈格孢菌磷相互作用結構域蛋白1抗體Anti-CDK16 Antibody外基質金屬蛋白誘導因子(EMMPRIN/CD147)

硫磺菌蛋白質磷2調節亞基1A抗體Anti-CDK4 Antibody凋亡因子配體(Fas-Ligand)

地霉蛋白質磷2調節亞基1B抗體Anti-CDK4 Antibody(PB0563)糖蛋白130(gp130/CD130)

酒紅鏈霉菌蛋白質磷2調節亞基3A抗體Anti-CDK5 Antibody胎球蛋白A(Fetuin-A)

膠孢蛋白質磷1B抗體（PP2Cβ）Anti-CDK5R1 Antibody胎球蛋白A(FetuinA)

球孢白僵菌蛋白質磷1G抗體（PP2Cγ）Anti-CDK6 Antibody性成纖維生長因子(FGF1)

亮白曲霉6磷果糖激1抗體Anti-CDK6 Antibody性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>98%

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>98%,BR

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：0.98
Acr-BisAGEs/FITC  熒光su標記晚期糖基化終末產物IgG規格： 0.2ml

AGER/RAGE/Cy3  熒光suCy3標記晚期糖基化終末產物特異性受體IgG規格： 0.2ml

Aggrecan/FITC  熒光su標記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖IgG規格： 0.2ml

Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC  熒光su標記軟骨蛋白聚糖IgG規格： 0.2ml

Agrin/FITC  熒光su標記聚集蛋白IgG規格： 0.2ml