鋅指示劑公司正在出售的產(chǎn)品：雞叉頭框蛋白O1(FOXO1)試劑盒Anti-ATF6B Antibody載脂蛋白-a1
雞角蛋白17(CK17/KRT17)試劑盒 Anti-ATF1 Antibody血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
雞低分子量角蛋白(CK-LMW)試劑盒Anti-ATF3 Antibody
雞甘氨酰tRNA合成酶(GARS)試劑盒 Anti-ATG16L2 Antibody芳香烴

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：金屬離子指示劑，鋅離子指示劑

注意事項(xiàng)：終點(diǎn)顏色變化為：藍(lán)-紅。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

腦膜炎奈瑟菌支鏈基轉(zhuǎn)2抗體Human GSG1L ELISA Kit小鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒

金龜子綠僵菌BCL2相關(guān)蛋白A1抗體Human GSPT2 ELISA Kit小鼠草膦乙酰轉(zhuǎn)移(PAT)免疫試劑盒

谷棒桿菌B淋巴瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 ELISA Kit小鼠不對(duì)稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒

釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GPS2 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒

腐生葡萄球菌腐生亞種防御β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒

釀酒酵母B活化因子受體抗體Human GPX4 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒

喜肌費(fèi)爾酵母TNF家族B激活因子抗體Human GPX7 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒

橄欖鏈霉菌蛇巴曲抗體Human GPX5 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒

青紫黑鏈霉菌大腦蛋白2抗體Human GPX8 ELISA Kit小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34程序性死亡配體1抗體Human GRAMD1B ELISA Kit小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒

乳微桿菌B7-H4抗體Human GRAMD4 ELISA Kit小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒

小馬勃3-2β分泌抗體Human GRB7 ELISA Kit小鼠型肝炎抗體(IgG)免疫試劑盒

東方伊薩酵母相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體Human GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) ELISA Kit小鼠激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒

冷湖黃桿菌BaxHuman GRID1 ELISA Kit小鼠激(PK)免疫試劑盒

少根根霉程序性死亡配體2抗體Human GPS2 ELISA Kit小鼠二酰脫羧,線粒體(MLYCD)免疫試劑盒

解蛋白弧菌膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11抗體Human GPSM2 ELISA Kit小鼠二單酰(malonyl CoA) 免疫試劑盒

44958=JCM12462資源名稱: 氧化假諾氏菌 質(zhì)量規(guī)格：純度(銅)：52.5~56.5%β葡萄糖苷試劑盒3,4,5-三氧基

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRβ葡萄糖苷試劑盒3,4,5-三氧基酯

豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質(zhì)量規(guī)格：(Cu):36.0~38.0%,Tech Gradeβ萘試劑盒楊酯
鋅指示劑IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit  人抗α干擾su規(guī)格： 48T

Sc1-70-Ab(Human Sc1-70 Antibody) ELISA Kit  人抗Sc1-70規(guī)格： 48T

Jo1/HRS(Human Jo-1 Antibody) ELISA Kit  人Jo1/抗組氨酰tRNA合成mei規(guī)格： 48T

RNP-Ab(Human ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit  人抗核糖核蛋白規(guī)格： 48T

n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody) ELISA Kit  人抗天然脫氧核糖核suan規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。