甲基橙-酸性靛藍(lán)指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞唾液酸結(jié)合球蛋白樣凝集素10(SIGLEC10)試劑盒Anti-ABHD2 AntibodyPE-CY5標(biāo)記的驢抗兔IgG
雞大腦脂肪酸結(jié)合蛋白7(FABP7)試劑盒Anti-ACACA AntibodyAPC標(biāo)記的驢抗兔IgG
雞抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)試劑盒 Anti-ABHD8 AntibodyAlexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：混合酸堿指示劑,變色點(diǎn)pH4.1

注意事項(xiàng)：酸色：紫色,堿色：綠色。終點(diǎn)附近指示劑顏色變化的參考顏色：pH4.1藍(lán)色。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

裂褶菌AP-1μ2抗體Human LRRC8C ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒

柱形孢鏈霉菌肥大膜抑制性受體Allergin1抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒

傳染性支氣管炎病腦鈉通道蛋白1抗體Human LSAMP ELISA Kit小鼠胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒

土庫曼野野村氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit小鼠胰島降解(IDE)免疫試劑盒

黑木耳三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠胰島(INS)免疫試劑盒

黃桿菌甲胎蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit小鼠原激活肽(TAP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit小鼠-1(trypsin-1)免疫試劑盒

檸檬形克勒克酵母ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human LRRC41 ELISA Kit小鼠(trypsin)免疫試劑盒

球孢白僵菌肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠胰α淀粉(AMY2A)免疫試劑盒

Rhizobium alkalisoli性鈣調(diào)蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒

產(chǎn)腸大腸埃希氏菌磷化CD156b抗體Human LRRC4C ELISA Kit小鼠一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒

產(chǎn)朊假絲酵母乙脫氫5抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌乙脫氫6抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠葉(FA)免疫試劑盒

假單胞菌溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移5抗體Human LRRC18 ELISA Kit小鼠氧化型(GSSG)免疫試劑盒

粉狀畢赤酵母遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體Human LRCH3 ELISA Kit小鼠氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒

灰樹花G25免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體Human LRRC20 ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒

檸檬球菌Citricoccus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC胞外超氧化物歧化試劑盒3-乙南楝屬二酯

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR胞漿型磷脂A2-α試劑盒乙酰基二氫味草A

傘枝犁頭霉Absidia│corymbifera 質(zhì)量規(guī)格：BR包蟲抗體IgG 羽扇烯
甲基橙-酸性靛藍(lán)指示劑CC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit  人克拉拉細(xì)胞蛋白規(guī)格： 48T

HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit  人低氧誘導(dǎo)因子1α規(guī)格： 48T

MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit  人黑色su細(xì)胞規(guī)格： 48T

TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格： 48T

P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit  人P53規(guī)格： 48T