詳細介紹
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞分裂周期蛋白5抗體 |
英文名稱 | APC5 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
脫氧膠原吡啶交聯(lián)DPD英文名稱:Human Deoxypyridinoline crosslinks, DPD
膠原吡啶交聯(lián)PYD英文名稱:Human Pyridinoline crosslinks, PYD
葡萄球菌蛋白ASPA英文名稱:Human Staphylococal protein A, SPA
刀豆素AConA英文名稱:Human concanavalin A, ConA
游離原卟啉FEP英文名稱:Human Free erythrocyte proloporphyrin, FEP
脂多糖結合蛋白LBP英文名稱:Human lipolysaccharide binding protein, LBP
谷胱甘肽過氧化酶GSH-Px英文名稱:Human Glutathione peroxidase, GSH-Px
谷胱甘肽GSH英文名稱:Human glutathione, GSH
17-酮類固醇17-KS英文名稱:Human 17-ketosteroids, 17-KS
17羥皮質(zhì)類固醇17-OHCS英文名稱:Human 17-Hydroxycorticosteroids, 17-OHCS
組織蛋白酶Kcath-K英文名稱:Human Cathepsin K, cath-K
骨形成蛋白BMPs英文名稱:Human bone morphogenetic proteins, BMPs
視黃醇結合蛋白4RBP-4英文名稱:Human Retinol binding protein 4, RBP-4
蛋白脂質(zhì)蛋白抗體PLP英文名稱:Human proteolipid protein, PLP
垂草扁桃酸VMA英文名稱:Human vanillylmandelic acid, VMA
細胞分裂周期蛋白5抗體Comamonas testosteroni分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學研究。培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hyw-Jones提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應用領域: 子座棒狀,生于鱗翅目幼蟲體上,一般只長一個子座,少數(shù)2-3個,從寄主頭部、胸中生出至地面。長5-12cm,基部粗1.5-2cm,頭部圓柱形,褐色,中空。子囊殼橢圓形至卵圓形,基部埋于子座中,330-500μm×138-240μm,子囊長圓筒形,240-480μm×12-16μm。子囊孢子2-3個,無色,線形,橫隔多且不斷,160-470μm×4.5-6μm。自然分布在海拔3000-5000米之間的高山草甸和高山灌叢帶,寄生于蟲草蝙蝠蛾(Hepialus armoricanus)的幼蟲體上。每年5-7月份出????_x0012_貫??_x0012_腙癖_x000E_?_x0012_#?_x0012_?培養(yǎng)基: 14存儲條件: 定期移植法
瑞氏青霉種屬: Penicillium raistrickii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 15α羥化。培養(yǎng)基: CM0181生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Psychrobacter cibarius分離基物: 土壤/南極土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 待定培養(yǎng)基: 33生長條件: 20-25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Bacillus sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分類、研究,具有作為動物益生菌、飼料淀粉酶潛力。培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法
無殼散囊菌種屬: Eurotium athecium提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0016生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Cordyceps militaris提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 藥用培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
玫瑰色紅球菌種屬: Rhodococcus rhodochrous提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0011生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Streptomyces sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。