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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
熒光抗體稀釋液 | 50ml | FS-R7287 |
產品分類:免疫組化
儲存條件:室溫,12個月
用途:熒光抗體稀釋,消除熒光抗體非特異性染色,可以用于減緩各種常見熒光抗體的熒光淬滅。Leagene熒光抗體稀釋液主要由Kolmers鹽溶液、抗熒光衰減劑組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
*櫻桃鏈格孢環(huán)化核苷調控陽離子通道蛋白亞型4Human SLC7A4 ELISA Kit大鼠α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
漢遜德巴酵母HEAT重復內含蛋白8蛋白抗體Human SLC5A3 ELISA Kit大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒
稀疏鏈霉菌稀疏變種雄激調節(jié)樣蛋白抗體Human SLTM ELISA Kit大鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒
芽孢桿菌雄激調節(jié)蛋白2抗體Human SLC6A8 ELISA Kit大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌角化蛋白S100A18抗體Human SLC38A3 ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)免疫試劑盒
產黑色鏈霉菌型肝炎病NS4B抗體Human SLC38A4 ELISA Kit大鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒
黃桿菌異質性核糖核蛋白C1/C2抗體Human SLC9A11 ELISA Kit大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
藍色犁頭霉異質性核糖核蛋白RHuman SLC3A1 ELISA Kit大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)免疫試劑盒
白地霉同源相互作用蛋白激4抗體Human SLC9A9 ELISA Kit大鼠VGF神經生長因子誘導蛋白(VGF)免疫試劑盒
球毛殼菌肝輔助因子II抗體Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠U型肌激,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒
鉤狀木霉組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫試劑盒
鏈格孢屬透明質及粘蛋白4抗體Human SLC44A1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體9(TLR9)免疫試劑盒
綠葉假單胞菌神經特異性鈣結合蛋白抗體Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體7(TLR-7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌無毛發(fā)蛋白抗體Human APC(Adenomatous polyposis coli protein) ELISA Kit大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒
東方伊薩酵母心臟和神經嵴衍生蛋白2抗體Human SLC45A2 ELISA Kit大鼠toll樣受體3(TLR3)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌乙?;M蛋白H4(K16)抗體Human SLC47A1 ELISA Kit大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母Pichia│farinosa 質量規(guī)格:分析標準品芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質量規(guī)格:10μg/ml,u=5%川續(xù)斷皂苷VI
短芽孢桿菌Bacillus│brevis 質量規(guī)格:分析標準品異甘草
熒光抗體稀釋液CCK ELISA Kit 大鼠膽囊收縮su/腸促胰mei肽規(guī)格: 48T
BGP/Gehrelin ELISA Kit 大鼠腦腸肽規(guī)格: 48T
6-K-PG ELISA Kit 大鼠6tong前列腺su規(guī)格: 48T
apo-A1 ELISA Kit 大鼠載脂蛋白A1規(guī)格: 48T
apo-B0 ELISA Kit 大鼠載脂蛋白B0規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。