詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。
產品名稱 | 肌動蛋白結合蛋白CFL抗體 |
英文名稱 | Cofilin |
規格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)Rhizobium alkalisoli注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)節桿菌拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus
大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)所多瑪鹽紅菌拉丁屬名: Halorubrum sod952ense
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)山梨木糖假絲酵母拉丁屬名: Candida sorboxylosa
大鼠游離脂肪酸(FFA)陽極還原地桿菌拉丁屬名: Geobacter anodireducens
大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)稻梨孢拉丁屬名: Piricularia oryza
大鼠骨粘連蛋白(ON)赤霉菌拉丁屬名: Gibberella sp.
大鼠葉酸(FA)核黃素德沃斯氏菌拉丁屬名: Devosia riboflavina
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)豇豆慢生根瘤菌用途: 無效菌株,作標記用,與花生共生固氮
大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
大鼠糖皮質類固受體(GR)土壤伯克氏菌拉丁屬名: Burkholderia soli
大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)亮白曲霉拉丁屬名: Aspergillus candidus
大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)黃曲霉拉丁屬名: Aspergillus flavus
大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12) 黃色毛霉拉丁屬名: Mucor flavus
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140) 小紅酵母拉丁屬名: Rhodotorula minuta
肌動蛋白結合蛋白CFL抗體半乳糖凝集素相關蛋白A抗體22-Dehydroclerosterol glucoside中文名:別名:分子式:C35H56O6
半乳糖凝集素12抗體22-Dehydroclerosterol中文名:22-去氫赤桐甾醇別名:Stigmasta-5,22,25-trien-3-ol分子式:C29H46O
γ氨基丁酸運載蛋白3抗體Stigmastane-3β,5α,6β-triol中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇別名:分子式:C29H52O3
促進成骨細胞分化因子抗體7α-Hydroxysitosterol中文名:7α-羥基谷甾醇別名:Ikshusterol; Stigmast-5-ene-3β,7α-diol分子式:C29H50O2
甘油磷酸二酯酶磷酸結構域3抗體Ecdysterone 20,22-moacetonide中文名:別名:20-Hydroxyecdysone 20,22-acetonide分子式:C30H48O7