Miller培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)試劑盒 Anti-ERBB2 AntibodyG蛋白結(jié)合蛋白RAB11a抗體
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兔大腸癌專一抗原3(CCSA-3)試劑盒 Anti-ERBB4 AntibodyRAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17抗體
兔協(xié)同激

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件：4℃,6個月

用途：植物組織培養(yǎng)常用基本培養(yǎng)基

注意事項：主要由硝酸鉀、硝酸鈣、硫suan鎂、磷酸鹽等組成，硝酸鉀工作濃度為1000mg/L、硝酸an工作濃度為1000mg/L。該試劑特點是硝酸鹽含量較高，經(jīng)高壓滅菌，為無菌溶液。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

17b-hydroxyandrost-4-ene-3-... OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg

17α-Methyltestosterone（標準品） Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g

1，3-（標準品） Oxytetracycline HCl22號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg

1，6-二氫-2-基-6-氧代-（3，4’-二吡啶）... Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g

2,3,4-三氧基（標準品） Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg

2,3,4-三氧基（標準品） Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g

2,3,4-三氧基（標準品） Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g

2,3-丁二(標準品,≥99.0%(GC)) Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g

2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽（鹽... Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g

2,6-二（標準品） Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g

2,6-二基（標準品） Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

2-（4-異丁?；藴势罚?Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g

2-基-4-（標準品） Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g

2-乙酰（標準品） Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g

2-單硝異山梨酯（標準品） Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg

紅曲霉（斜面）Monascus anka 質(zhì)量規(guī)格：>95%血小板相關(guān)免疫球蛋白試劑盒亞麻木;Secoisolaricir

白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：≥595 µg/mg,BR血小板相關(guān)抗體IgM試劑盒氧化;Ammothamnine

亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定血小板生成自身抗體試劑盒野;Scularin
Miller培養(yǎng)基M-CSF/FITC  熒光標記巨噬克隆激因子IgG纖維 18-22mPa.s, 5%苯/異80:20

M-CSF Receptor/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠巨噬集落激因子受體IgG纖維 45-55mPa.s, 5%苯/異80:20

Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠肥大蛋白7IgG纖維 90-1mPa.s,5%苯/異80:20

TPSB2/Tryptase Beta2/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠肥大類胰蛋白β2IgG纖維 180-220mPa.s, 5%苯/異80:20

MCT1/FITC  熒光標記單羧轉(zhuǎn)運蛋白-1IgG纖維 270-330mPa.s,5%苯/異80:20

MDM2/FITC  熒光標記雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖，一水 98%

Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC  熒光標記化雙微體2癌因IgGD(+)-乳糖，一水 藥用級

Mdr-1/FITC  熒光標記多藥耐藥蛋白IgGD(+)-乳糖一水合物  Ultra Pure,≥99.5% (HPLC)