詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質細胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現出不同的生理意義。 測定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321197 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
小白菊內酯(標準品)英文名: Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白包裝100g
小駁骨(標準品)英文名: S-Benzyl-L-cysteine組蛋白H2B.s抗體包裝25g
小檗紅堿(標準品)英文名: L-Glutamic acid hydrochloride組蛋白去乙?;?+5+9抗體包裝5g
小檗堿(標準品)英文名: Nω-Nitro-L-arginine熱休克蛋白27相關蛋白1抗體包裝25g
小檗皮(標準品)英文名: Nalpha-Benzoyl-L-arginine卟膽原脫抗體包裝5g
小豆蔻明(標準品)英文名: L-Asparagine Anhydrous異質核糖核蛋白U2樣蛋白抗體包裝25g
小茴香(標準品)英文名: L-Asparagine anhydrous肝癌衍生生長因子2抗體包裝5g
小薊(標準品)英文名: N'-Trityl-L-asparagine肝癌相關抗原57抗體包裝1g
小秦艽(標準品)英文名: L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester補體C3抗體包裝5g
小葉榕(標準品)英文名: L-Aspartic acid 1-methyl ester型流感病血凝抗體包裝25ml
纈草三酯英文名: L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride狀旁腺功能亢進蛋白2/分裂周期73抗體包裝5ml
薤白(標準品)英文名: S-Methyl-L-cysteine線粒體絲蛋白抗體包裝100g
辛弗林(標準品)英文名: S-Trityl-L-cysteine/鈉超化激活環核苷門控通道蛋白2抗體包裝25g
辛弗林鹽鹽(標準品)英文名: L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester熱休克蛋白β7抗體包裝5g
辛辣內酯A(標準品)英文名: L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride/鈉超化激活環核苷門控通道蛋白3抗體包裝1ml
平常假絲酵母Candida│inconspicus 質量規格:≥98%,標準品用于含量測定梅螺旋體試劑盒;Triptolide
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)Verticillium│dahliae 質量規格:≥98.5%,BR,二合物梅螺旋體試劑盒紅;Celastrol
長裙竹蓀Dictyophora│indusiata 質量規格:純度>99%,BR,可用于培養錨蛋白B試劑盒落新婦苷;Astilbin
脂蛋白酯酶(LPL)測試盒50管/24樣麥根腐平臍蠕孢 二甲基二酸二甲酯生物Elisa
希瓦氏屬 3,5-二溴甲酯轉鐵蛋白受體1Elisa
青春雙歧桿 2-硝基-9,9-二甲基芴絲蟲抗體IGgElisa
烏芝 1,6-己成纖維生長因子18Elisa
茄鏈格孢 奧沙秦鈉表面原性蛋白Elisa
哈里法克斯希瓦氏 2,3-吡啶二甲酸二甲酯正五聚蛋白2Elisa
剛果嗜皮 1,1'-聯萘羧肽B2Elisa
赭色擲孢酵母 2,3-二氨基血纖蛋白原γ鏈Elisa
黃蜜環 2,6-萘二磺酸鈉3-羥-3-甲戊二酸單酰還原Elisa
馬葡萄球 2,3-二甲酸去乙酰化Sirtuin-4Elisa
農藥速測 5--2-苯基-3H-咪唑-4-甲去乙?;疭irtuin-3Elisa
大腸埃希氏桿 3--4-甲氧羰基苯基酸紅富鐵Elisa
大腸埃希氏 4-乙酰吡啶6磷酸果糖2激;果糖-2,6-二磷酸3Elisa
桿狀毛霉 五氟磷酸化MEK激Elisa
雜色曲霉 L-蘇P-CREBElisa