詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321290 |
商品介紹:
測定意義:
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統中具有重要作用。測定原理:H2O2在240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應S-CAT活性的高低。需自備的儀器和用品:紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
依諾肝鈉英文名: Tin (II) oxalate蛋白酪磷H1抗體包裝25g
依曲替酯;阿維酯英文名: Tin (IV) oxide磷化磷脂酰肌激催化亞單位D抗體包裝5g
依曲韋林英文名: Titanium (III) sulfate磷化周期檢查控制蛋白質抗體包裝1g
依替膦鈉英文名: Titanium (IV) sulfate穿孔抗體包裝250mg
*度英文名: Tributyl citratePALM3抗體包裝100g
咪酯英文名: Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution芳香酯1(對氧磷)抗體包裝25g
乙嘧啶英文名: Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas磷吡哆氧化抗體包裝100g
乙昔羅鈉英文名: Tryptamine磷化蛋白激C抗體包裝25g
異特英文名: Tungsten (VI) oxide磷化蛋白激C抗體包裝500g
吲達帕英文名: Tungsten carbide-200磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體包裝1g
辛英文名: Tungsten powder磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體包裝250mg
右旋蘭索唑英文名: Tungstic (VI) acid磷化磷脂酰肌激抗體包裝100g
右旋洛芬英文名: Verruculogen from Penicillium verruculosum磷化磷脂酰肌激抗體包裝25g
右旋洛芬丁三英文名: Wool fat磷化蛋白激C抗體包裝5g
右佐匹克英文名: X-GLUC, sodium salt磷化蛋白激C抗體包裝25g
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質量規格:HPLC≥98%,標準品胱天蛋白3試劑盒黃芪苷(黃芪皂苷IV)-對照品;有報告
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC≥98%,標準品胱天蛋白12試劑盒(內酯)-對照品;有報
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:HPLC≥98%,標準品胱天蛋白10試劑盒野百合堿(豬屎豆堿)-對照品;有報告
土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒50管/24樣枯草芽胞桿 3-氨基-4-氟甲酯ERp57Elisa
枯草芽孢桿 2-氟脂褐Elisa
大孢鏈霉 5-降烯-2,3-二羧酸一甲酯心型脂肪酸結合蛋白Elisa
近弧狀短波單胞 鉛(II)BPDE-DNA加合物Elisa
根瘤 1--3-乙氧基烷周期依賴性激2Elisa
秦氏蜜環 順-4-氨基環己烷甲酸可溶性β淀粉樣蛋白Elisa
鏈球屬 4-氨基-3-溴喹啉不可溶性β淀粉樣蛋白Elisa
艱難鏈霉 3-氧代-3,4-二氫-2-喹喔啉甲酸乙酯雷帕霉靶蛋白Elisa
紅球 4-氨基鄰苯二甲酰亞單氧化BElisa
大腸埃希 4-氟-1,2-苯二腸道病71型IgG抗體Elisa
唐菖蒲伯克霍爾德氏 6--1,2,3,4-四氫咔唑蛋白酪磷酸抗體Elisa
尾孢屬 2--3,5-二氟苯甘油磷酸Elisa
釀酒酵母 3-氨基-5-甲基己酸過氧化氫Elisa
小鏈霉(小諾氏) N-(2,3,4-三氟苯)乙酰苯抗雙鏈DNA-IgG抗體Elisa
總狀橫梗霉 陽離子桃紅FG抗雙鏈DNA-IgM抗體Elisa