HT Media Supplement公司正在銷售的產(chǎn)品：兔原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒 Anti-CR1 Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)試劑盒Anti-CRB1 Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔白介素2受體β(IL-2Rβ)試劑盒Anti-CREB1 Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體
兔肌腱蛋白C(TNC)試劑盒An

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  —20℃,避光,12個(gè)月

用途  HT培養(yǎng)基添加劑,是次huang嘌呤和胸腺嘧啶核苷的混合物,適用于雜交瘤選擇和細(xì)胞培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)  無菌溶液,主要由次huang嘌呤、胸腺嘧啶核苷。10ml可制備500mL培養(yǎng)基。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

胱天蛋白11(CASP11)CASP11 ELISA KitC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體包裝25mg

胱天蛋白1(CASP1)CASP1 ELISA KitCD226抗體包裝25g

胱硫醚β合(CβS)CβS ELISA KitCD26抗體包裝5g

骨形成蛋白8B(BMP8B)BMP8B ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體包裝5g

骨形成蛋白6(BMP6)BMP6 ELISA Kit緊密連接蛋白20抗體包裝1g

骨形成蛋白1(BMP1)BMP1 ELISA Kit中心體蛋白135抗體包裝5g

骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)MUSK ELISA Kit半胱蛋白蛋白-7抗體包裝100g

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)TNNT1 ELISA Kit鈣調(diào)節(jié)抗體（鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)）包裝10g

骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)TNNI2 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框181抗體包裝25g

骨鈣(OC)OC ELISA KitⅠ型補(bǔ)體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）包裝25mg

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)BMPRⅡ ELISA Kit8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體包裝1g

骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)BMPR1A ELISA Kit結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝5g

骨成型蛋白7(BMP7)BMP7 ELISA Kit色P450 2C9抗體包裝10MG

骨成型蛋白4(BMP4)BMP4 ELISA Kit色P450 2D6抗體包裝100g

骨成型蛋白2(BMP2)BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗體包裝25g

特羅伊察棲砂桿菌Arenibacter│troitsensis 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定早老2試劑盒乙酰化白藜蘆;Acetyl-trans

長(zhǎng)柄鏈格孢Alternaria│longipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,合物早老1試劑盒羊藿次苷II;Icarisid II

鮑希瓦氏菌Shewanella│haliotis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白試劑盒茵芋苷;Skimmin
HT Media SupplementHSP-27/FITC  熒光標(biāo)記HSP-27蛋白IgGD(+)-樟腦（天然） 98%

HSP-47/FITC  熒光標(biāo)記熱休克蛋白-47蛋白IgG異(正+反) ，用于環(huán)境分析

HSP-60/FITC  熒光標(biāo)記熱休克蛋白-60蛋白IgG異(正+反) 97%

HSP-70/FITC  熒光標(biāo)記HSP-70蛋白IgG（-）-薄荷 Standard for GC ,≥99.5% (GC)

HSP75/TRAP-1 /FITC   熒光標(biāo)記熱休克蛋白-75IgG（-）-薄荷 99.5%

OMPC/OMPA/FITC  熒光標(biāo)記抗大腸桿菌外膜孔道蛋白CIgG（-）-薄荷 99%

HSP-90 Alpha/FITC  熒光標(biāo)記HSP-90α蛋白IgG（-）-薄荷 ，≥99.5%

HSP-90 Alpha/FITC  熒光標(biāo)記熱休克蛋白90αIgG氨磺  98%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。