細胞線粒體分離試劑盒公司正在銷售的產品：兔基質裂解蛋白/基質溶素(MAT)試劑盒Anti-GDNF Antibody磷酸化D激酶衰減蛋白1抗體
兔蛋白激酶C-ζ(PKCζ)試劑盒Anti-GFAP Antibody可溶性附著蛋白α-SNAP抗體
兔TATA框結合蛋白相關因子2(TAF2)試劑盒Anti-GFAP Antibody(0046)信號轉導和轉錄激活因子4抗體
兔蛋白激酶C-δ1(PKCδ

產品分類：細胞組分分離

儲存條件：—20℃,12個月

用途：快速分離動物硬組織(如骨骼肌)中的線粒體的試劑盒

注意事項：分離線粒體的同時可以獲得去除線粒體的細胞漿蛋白,可用于分析細胞se素C等線粒體蛋白向胞漿的釋放,大部分獲得的線粒體都含有完整的內膜和外膜,并具有線粒體的生理功能(如檢測線粒體膜電位),獲得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、雙向電泳等蛋白分析。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

灰黃霉(標準品) Ethionamide補體C1RL鏈多肽抗體包裝5g

灰黃霉（標準品） Etravirine周期M2抗體包裝100g

回西坦;（標準品） Famotidine周期T2抗體包裝25g

（標準品） Famotidine周期K抗體包裝5g

茴香（標準品） Febuxostat抗菌肽CAMP抗體包裝25g

肌(標準品) Febuxostat5號染色體開放閱讀框4抗體包裝5g

(標準品) Phenacetin4號染色體開放閱讀框44抗體包裝1g

肌酐（標準品） Phenacetin4號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g

肌（標準品） Fingolimod HCL /FTY-7204號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g

吉羅齊（標準品） Fingolimod HCL /FTY-7205號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g

吉莫斯特;(標準品) Flufenamic acid9號染色體開放閱讀框89抗體包裝5mg

吉它霉（標準品） Flufenamic acid19號染色體開放閱讀框66抗體包裝1mg

己內酰（標準品） Flumazenil21號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g

（標準品） Flumazenil21號染色體開放閱讀框70抗體包裝25g

（標準品） Fluoxetine Hydrochloride胱抑A/半胱蛋白抑制劑A抗體包裝5g

里微球菌Micrococcus│lylae 質量規格：>98%小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體3試劑盒五味子酯;Schisantherin

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規格：≥99.0%,BR小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體2試劑盒;Aconitine

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格：含量>99.0%小扁豆結合型胎蛋白/胎蛋白異質體1試劑盒五味子;Schisandrin A
細胞線粒體分離試劑盒OAT-3/FITC  熒光標記陰離子轉運蛋白-3IgG硫代硫鈉，五水 ACS, 99.5%

OAT4L/URAT1 /FITC  熒光標記尿鹽重吸收轉運子1IgG氫二鈉，十二水 AR，99%

obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC  熒光標記肥胖抑制IgG辛鈉 99%

OCLN(Occluding)/FITC  熒光標記人咬合蛋白IgG卡拉膠 試劑級

ODC/FITC  熒光標記抗鳥氨脫羧IgG果膠 半乳糖(干計)≥74.0 %

OCT1 /FITC  熒光標記陽離子轉運器1IgG單硬脂甘油酯 >60.0%(GC)

OCT2 /FITC  熒光標記陽離子轉運蛋白2IgG鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)

Oct-4/FITC  熒光標記胚胎干關鍵蛋白IgG信封 5號,1mm*220mm