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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321308 |
商品介紹：
測定意義 幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中，而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。 測定原理 幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯jia醛產生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿，甲苯、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
黑曲霉艾滋病病復制結合蛋白抗體Human KLHL21 ELISA Kit小鼠胎盤泌乳(PL)免疫試劑盒
紅菇屬AFP4b蛋白抗體Human KLHL22 ELISA Kit小鼠鎖鏈免疫試劑盒
泡盛曲霉HIV-1病復制結合蛋白2抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌伴侶蛋白bc1同源復合體抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠髓樣觸發性受體2(TREM2)免疫試劑盒
梭菌心肌錨蛋白重復結構域1抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒
楊生盾殼霉抑制蛋白結構域蛋白1抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體 免疫試劑盒
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白3抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白4抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠性磷(ACP)免疫試劑盒
白靈側耳雌二抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
黑曲霉淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠性β葡萄糖苷(GBA)免疫試劑盒
蘋果黑腐皮殼淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒
茄鏈格孢菌轉錄激活蛋白crsp70抗體Human Kindlin 2 ELISA Kit小鼠絲轉肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒
根瘤菌卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體Human KIR2DL3 ELISA Kit小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
平菇載脂蛋白C3抗體Human KIR2DS4 ELISA Kit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
: NBRC12714資源名稱: 凝結芽孢桿菌 質量規格：Type I-S; from bovine submaxillary glands白介6受體試劑盒9-硝基
仁果叢梗孢Monilia│fructigena (Pers.) Pers. 質量規格：>98%,EP白介6試劑盒香草
鏈格孢Alternaria│alternata (Fr.) Keissl. 質量規格：>98%,BR白介5受體alpha試劑盒雪松
土壤幾丁質酶測試盒50管/24樣枯草芽胞桿 2,2,2-三酯核糖核酸IgG抗體Elisa
蘋果鏈格孢 鹽酸米托蒽醌羥甲基戊二酸單酰Elisa
大腸埃希 4-甲氧基-3-硝基吡啶尿激型纖溶原激活物Elisa
盤長孢狀盤孢 甲基對甲苯砜鈣依賴型磷脂A2Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 7-氟滿二酮磷酸化雷帕霉靶蛋白Elisa
比克邁耶氏酵母 4，5-二甲基-1，2-苯二死骨片1Elisa
季也蒙畢赤酵母 4-甲基-2-甲氧基自噬基因Beclin 1Elisa
茶炭疽病 2-乙基己酸鹽自噬相關蛋白5Elisa
枯草芽孢桿 2',4'-二-5'-氟苯乙酮微管相關蛋白1A;1B輕鏈3BElisa
大腸埃希氏(大腸桿) 對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯低密度脂蛋白受體相關蛋白1Elisa
綠僵 3,5-二溴-2-羥基磷酸化乙酰Elisa
矩圓黑盤孢 2,4-二羥基苯甲酰鞘磷脂合成1Elisa
科羅多擬無枝酸 3-乙酰基磷酸化乙酰羧化Elisa
釀酒酵母 氟苯咪唑硝基還原Elisa
灰色鏈霉灰色亞種 2-甲基-2-戊烯酸血紅加氧Elisa
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