詳細介紹
公司產品僅供科研使用:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | AS6321198 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義 高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽固醇,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫",對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉化為FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產品優點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩定性好:批內CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
辛夷(望春花)(標準品)英文名: L-Glutamic acid 5-methyl ester鐵調節蛋白25抗體包裝100g
辛夷脂(標準品)英文名: N-Acetyl-L-leucineHD域內含蛋白2抗體包裝25g
新補骨脂異黃(標準品)英文名: L-Orn(Z)-OH艾滋病病p55抗體包裝5g
新(標準品)英文名: N-Acetyl-L-phenylalanine造血激抗體包裝1g
新二氫查爾(標準品)英文名: L-ProlinamideHEAT重復內含蛋白5B蛋白抗體包裝25g
新內酯(標準品)英文名: N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine缺氧誘導基因1B蛋白抗體包裝5g
新地奧斯明英文名: O-Benzyl-L-serine乙酰化組蛋白H4抗體包裝1g
新綠原(標準品)英文名: O-tert-Butyl-L-serine 熱休克蛋白B2抗體包裝5g
新芒果苷(標準品)英文名: CAL-101 (GS-1101)人類白抗原B27包裝25MG
新藤黃(標準品)英文名: O-tert-Butyl-L-threonine螺旋環螺旋轉錄因子HATH6抗體包裝25g
新烏頭原堿(標準品)英文名: L-dopa,Levodopa神經調節蛋白1β2抗體包裝5g
杏葉防風(標準品)英文名: L-dopaHDHD3蛋白抗體包裝1g
雄蠶蛾(家蠶)(標準品)英文名: L-a-Aminoadipic acidHEATR3蛋白抗體包裝5g
熊膽粉(標準品)英文名: L-Cyclopropylalanine癌增強蛋白抗體包裝1g
熊果苷(標準品)英文名: L-Homophenylalanine單基組蛋白H3K9抗體包裝25g
庫爾勒海洋桿菌Pontibacter│korlensis 質量規格:HPLC>98%,標準品毛細血管擴張性共濟失調突變基因試劑盒蘆丁;Rutin
雞白痢沙門氏菌Salmonella│pullorum 質量規格:>99%,BR麻疹病試劑盒克班寧;Crebanine
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:>99%,標準品麻疹病試劑盒苦龍膽酯苷;aMarogentin
ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒100管/96樣馬克斯克魯維酵母 己烯雌絲棕櫚酰轉移長鏈堿性亞基1Elisa
鞘氨盒屬 2-氟-3-硝基-5-吡啶冠蛋白1AElisa
產氣腸桿 球蛋白κElisa
假單胞屬 4-溴-3-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑濾泡型轉運蛋白1Elisa
馬闊里類芽孢桿 二乙基異基萊姆病Elisa
球孢白僵 3-酸甲酯抗單核抗體Elisa
枯草芽孢桿 2-甲基丁酸π--S-轉移Elisa
球孢鏈霉 2,3-二天冬酰合成Elisa
平菇 甘鹽酸鹽酸Elisa
玫煙色棒束孢 新戊酰基乙鳥苷一磷酸Elisa
腐皮殼 3,3'-二氨基二苯砜脂肪酸轉位Elisa
熱帶假絲酵母 3-溴-2-氟甲苯人白介2受體α亞基Elisa
大西洋魯杰氏 D-氫化乳清酸延胡索酸水合Elisa
滑菇 甘氨膽酸水合物1,4,5-三磷酸肌Elisa
缺陷短波單胞 L-氫化乳清酸核酮糖-1,5-二磷酸羧化;加氧Elisa
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。