詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321184 |
商品介紹:
測定意義: AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。 測定原理: AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,同時還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412nm吸光度增加速率,來計算AAT活性。 自備儀器和用品: 研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
三白草(標準品)英文名: Fluorescein Chloride 磷化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1抗體包裝5g
三白草(標準品)英文名: 2',7'-Dichlorofluorescein磷化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1包裝1g
三叉苦(標準品)英文名: 2,3-Diaminonaphthalene葡萄糖激調節蛋白抗體包裝5g
三尖杉堿(標準品)英文名: Dimidium BromideGTP結合蛋白10抗體包裝1g
三尖杉寧堿(標準品)英文名: 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin磷化Ras GTP活化蛋白結合蛋白1抗體包裝5g
三角葉英文名: 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarinRas GTP活化蛋白結合蛋白1抗體包裝25g
三棱(標準品)英文名: 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acidγ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
三七(標準品)英文名: Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate磷化糖原合激3β抗體包裝1g
三七皂甙R1(標準品)英文名: Uranine K磷化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷Fa英文名: Fluorescein Diacetate磷化珠蛋白轉錄因子1抗體包裝25g
三七皂苷Fe(標準品)英文名: 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid磷化珠蛋白轉錄因子1抗體包裝5g
三七皂苷Ft1(標準品)英文名: 7-Diethylamino-4-methylcoumarinG蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷R2(R型)(標準品)英文名: Methyl Calcein Blue Hydrate磷化GATA結合蛋白6抗體包裝25g
三七皂苷R2(S型)(標準品)英文名: 6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin磷化γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
三七總皂苷(標準品)英文名: 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin胰高血糖受體抗體包裝100g
嗜松青霉Penicillium│pinophilum 質量規格:≥99%鳥脫羧試劑盒乙;Tripdiolide
: B90資源名稱: 產氣腸桿菌 質量規格:HPLC≥98%,標準品黏著斑激試劑盒硫秋仙苷;Thiocolchicosi
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:>99%,AR黏膜地址黏附分子試劑盒硫長春堿;Vinblastine su
酰基轉移酶(AAT)測試盒100管/96樣根瘤 β-內酰基質衍生因子2Elisa
熒光假單胞 二水氧化三基質衍生因子4Elisa
運動節桿 硝基乙酸乙酯Thimet脫寡肽1Elisa
釀酒酵母 1,3-苯二甲硫三磷酸Elisa
皮狀絲孢酵母 1,3-二(溴甲基)苯RAS相關蛋白RAB-27AElisa
啤酒神金黃桿 二(對傘花烴)釕(II)二聚體間隙連接蛋白37Elisa
盾殼霉 二乙酸酯絲蛋白Elisa
澳型核果褐腐病 2-溴-6-甲苯間隙連接蛋白47Elisa
黑曲霉 1-二苯甲基-3-羥基氮雜環丁烷鹽酸鹽AP核酸內切-1Elisa
白僵 對溴甲酸黃腺二核苷酸Elisa
果生鏈核盤 N-甲基-對甲苯乙酰受體IgG1抗體Elisa
木賊鐮孢 2,5-雙(1-萘基)-1,3,4-惡二唑組織相容性復合體Ⅰ類相關基因BElisa
唾液乳桿 2-苯乙早老1Elisa
泡囊短波單胞 占噸酮µ型受體Elisa
康氏木霉 N-芐氧羰基-BETA-氨基-D-類缺陷病2Elisa