甘油PBS封片劑公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒Anti-NEFM Antibody小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1
大鼠白介素2(IL-2)試劑盒Anti-NEK2 Antibody兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)
大鼠白介素4(IL-4)試劑盒Anti-NEK5 Antibody人CD4分子
大鼠白介素6(IL-6)試劑盒Anti-NEK5 Antibody兔骨堿性磷酸酶 ELISA

產(chǎn)品分類(lèi)：免疫組化

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：常規(guī)切片和細(xì)胞涂片的封固,亦可以用于免疫組化的封閉

注意事項(xiàng)：主要由甘油、磷酸鹽等組成。如果需要長(zhǎng)期保存都要用油漆或者中性樹(shù)膠進(jìn)行封邊，否則時(shí)間長(zhǎng)了容易吸水或干燥，使材料變壞。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

細(xì)枝孢甘脫羧P蛋白抗體Human THRSP ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌核孔蛋白GLE1抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒

交替紅色桿菌屬腎小球上皮蛋白1抗體Human THTPA ELISA Kit大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

柱孢菌屬轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體Human THUMPD3 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

小棱盤(pán)菌麥角蛋白抗體Human TICAM2 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體Human TIGD5 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

溶淀粉類(lèi)芽孢桿菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體Human THUMPD1 ELISA Kit大鼠絡(luò)(TYR)免疫試劑盒

油菜菌核病菌谷酰酰水解抗體Human TIGD1 ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒

乳白耙菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體Human TIMELESS(Protein timeless homolog) ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒

大腸埃希菌糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體Human THOC7 ELISA Kit大鼠卵泡抑(FS)免疫試劑盒

東方伊薩酵母糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體Human TIMM10 ELISA Kit大鼠膽固酰基轉(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒

貝酵母膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體Human THOC6 ELISA Kit大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒

黑曲霉磷化糖皮質(zhì)激受體抗體Human THRAP3 ELISA Kit大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒

香菇葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Human Thrombospondin 3 ELISA Kit大鼠硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒

明蘇達(dá)被毛孢糖皮質(zhì)激受體β抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠硫類(lèi)肝(HS)免疫試劑盒

武夷小單孢菌胰島葡萄糖6磷2抗體Human TINP1 ELISA Kit大鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)芳樟

施氏微桿菌Microbacterium│schleiferi 質(zhì)量規(guī)格：柱層析用蓮心堿

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：柱層析用，200-400目蓮心堿高鹽
甘油PBS封片劑PTHrP ELISA Kit   大鼠jia狀旁腺激su相關(guān)蛋白規(guī)格： 48T

ACA-IgG ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgG規(guī)格： 48T

ACA-IgM ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgM規(guī)格： 48T

ACA-IgA ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgA規(guī)格： 48T

AP12 ELISA Kit  大鼠apelin 12規(guī)格： 48T