富血小板血漿制備液公司正在銷售的產品：兔血小板衍生生長因子亞基B(PDGFB)試劑盒Anti-GJC1 Antibody核蛋白相互作用蛋白1抗體
兔磷脂酶B(PLB)試劑盒Anti-GJC2 AntibodyFHOD3蛋白抗體
兔磷脂酶D2(PLD2)試劑盒Anti-GK Antibody肝生長因子激活抑制蛋白2抗體
兔磷酸化外信號調節(jié)激酶(pERK)試劑盒Anti-GLA Antibody和跨膜

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：細胞組分分離

儲存條件：4℃,6個月

用途：又稱富含血小板血漿分離液，將血小板與其他血細胞分開，但不與血漿分開。

注意事項：含有枸櫞酸鈉抗凝劑，100ml該溶液可分離900ml新鮮血液

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

泰樂菌(標準品) Methocarbamol羧肽CPN2抗體包裝100g

托特羅定（標準品） Methocarbamol鈣/鈣調依賴蛋白激2D(CaMKIIδ)包裝25g

溴莫定(標準品) Methylprednisolone胞漿-5′-核苷-Ⅱ抗體包裝500g

聚乙烯（標準品） MethylprednisoloneCD86抗體包裝1g

決奈達(標準品) Mexiletine Hydrochloride周期依賴性激1抗體包裝250mg

咖啡(標準品) Mexiletine Hydrochloride周期依賴性激2抗體包裝100g

咖啡(標準品) Mezlocillin sodium周期依賴性激4抗體包裝25g

巴（標準品） Mezlocillin sodium周期依賴性激5抗體包裝100g

比多巴（標準品） Mifepristone1號染色體開放閱讀框200抗體包裝25g

鉑（標準品） Mifepristone6號染色體開放閱讀框223抗體包裝5g

洛芬（標準品） Mirtazapine纖維抗體包裝25g

絡磺鈉（標準品） MirtazapineC型凝集4家族E抗體包裝5g

莫(標準品) 5-Fluoroorotic acid,5-FOA蕈堿型乙酰受體抗體包裝25g

托普（標準品） Mosapride Citrate蕈堿型乙酰受體M2抗體包裝5g

托普二硫化物（標準品） Mosapride Citrate促進凋亡基因抗體包裝100g

AS3.852資源名稱: 日本根霉 質量規(guī)格：含量634μg/mg-739μg/mg,BR腺病3試劑盒土貝母苷;TubeiMosideIII

淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 質量規(guī)格：效價測定線粒體肽蛋亞砜還原試劑盒土貝母苷乙;TubeiMoside II

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：>98%,USP30,BR線粒體呼吸鏈復合物I 脫氫海堿;Dehydroglauci
富血小板血漿制備液P16/FITC  熒光標記兔抗抑癌因p16IgG過氧化環(huán)己酮  50%鄰苯二二辛酯溶液

P19ARF/FITC  熒光標記p19ARF抑癌因IgG石炭品紅 AR

P21/WAF1/CIP1 /FITC  熒光標記p21IgG鉻銫 99.9% metals basis

P27/kip1 /FITC  熒光標記P27/周期依賴激抑制劑IgG鉻銫 AR，99.5%

P27/kip1/Cy3  熒光Cy3標記P27/周期依賴激抑制劑IgG鄰苯二二正戊酯 CP,97%

P38 MAPK/FITC  熒光標記絲裂原活化蛋白激p38IgG鄰苯二二正戊酯 98%

P38 MAPK/RBITC  紅色熒光羅丹明(RBITC)標記絲裂原活化蛋白激p38IgG鄰苯二二癸酯 90%

P-p38 ERK/MAPK14 /FITC  熒光標記化-絲裂原活化蛋白激p38IgG2,6-二醌亞 AR,98.0%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。