詳細(xì)介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321202 |
商品介紹:
測定意義淀粉是植物中糖的主要儲存形式,其含量測定對于評價(jià)食品營養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
異黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tianeptine sodium salt硫乙酰肝6腦苷脂轉(zhuǎn)硫1抗體包裝250mg
異黃芪皂苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Glutamine 神經(jīng)保護(hù)肽HN抗體包裝5g
異茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Zaltoprofen大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體(N端)包裝100g
異苦參英文名: Sodium Glycocholate Hydrate透明質(zhì)合成1抗體包裝25g
異類葉升麻苷;異毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mannitol;D-Mannitol缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體包裝1g
異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Cysteine hydrochloride monohydrate缺氧誘導(dǎo)因子脯酰4羥化抗體包裝5g
異綠原A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Calpain Inhibitor II(ALLM)透明質(zhì)2/玻璃2抗體包裝100g
異綠原B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ethisterone心臟鈣粘蛋白抗體包裝25g
異綠原C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ethisterone17-β-羥脫氫6抗體包裝5g
異羅漢果皂苷 V英文名: D-CystineH5亞型全病抗體包裝1g
異芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Tryptophan人類皰疹病8 ORF14抗體包裝250mg
異牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Serine透明質(zhì)2/玻璃2抗體包裝25MG
異南五味子木脂寧英文名: L-Methionine同源盒蛋白B2抗體包裝250mg
異歐前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Phenylalanine同源盒蛋白B8抗體包裝5mg
異皮啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Asparagine monohydrate熱休克蛋白70家族蛋白6抗體包裝10mg
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,熔點(diǎn)18硫軟骨N-乙酰半乳糖基轉(zhuǎn)移1試劑盒苦杏仁苷;Amygdalin
43846=ATCC33205=IFO14230=JCM3312=KCCA-0312=NBRC14230資源名稱: 中間型高溫放線菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR硫軟骨試劑盒假荊芥屬苷;Nepitrin
埃及曲霉Aspergillus│egyptiacus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR硫皮膚-硫軟骨PG試劑盒5-O-維阿斯米;5-O-Methy
淀粉含量測試盒50管/48樣鉤狀木霉 3-氨基-5-溴-2-氟嘧啶異檸檬酸脫氫Elisa
鏈格孢屬 5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基吡啶異戊烯基腺Elisa
綠葉假單胞 6-氟-2-甲基-3丁酸Elisa
枯草芽孢桿 3-溴-5--2-氟吡啶酸Elisa
東方伊薩酵母 5-氟-2-甲氧基乙酸Elisa
短小芽孢桿 3-溴-5-氟-2-甲氧基吡啶乙酸氧化Elisa
釀酒酵母 6--3-氟-2-吡啶羧酸油菜內(nèi)酯Elisa
Luteolibacter 2--5-氟異油菜甾Elisa
埃希氏屬 2-氟-4-游離氨基酸Elisa
白乳菇 2--5-氟-4-吡啶游離脯Elisa
高地芽胞桿 2-溴-3-氟-4-游離脂肪酸Elisa
晦澀小粘束霉 2--3-溴-5-氟吡啶玉米Elisa
果生鏈核盤 2-叔丁基環(huán)己基乙酸酯玉米核苷Elisa
云南球蓋菇 1-甲基-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰蔗糖合成Elisa
騷動厄氏 2-溴-5--1,3-二氟苯蔗糖磷酸合成Elisa