詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長反應,主要負責直鏈淀粉的合成。測定原理GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉移到淀粉引物上,同時生成ADP;進一步通過反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應生成的ADP數量呈正比,通過340nm下測定NADPH的增加量,可以計算GBSS活性。需自備的的儀器和用品紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321210 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
Clematiunicinoside E英文名: Methyl Green磷化胰島受體底物-1抗體包裝1g
Clematomandshurica saponin ...英文名: Alizarin green磷化胰島受體底物-1抗體包裝5g
Corylifol A(標準品)英文名: Naphthol Green B磷化胰島受體底物-1抗體包裝25g
Crassicauline A(標準品)英文名: Fast Green FCF白介28B抗體包裝5g
Crovatin英文名: Alphazurine A即刻早期應答基因2蛋白抗體包裝1g
Croverin英文名: Light Green SF Yellowish三磷肌抗體包裝1g
D(十)-無葡萄糖(標準品)英文名: Janus Green B白介18結合蛋白抗體包裝5g
D-(-)-奎寧(標準品)英文名: Guinea Green B草酰琥珀脫羧抗體包裝25g
D-阿伯糖(標準品)英文名: Lissamine™ Green BIgLON家族蛋白5抗體包裝5g
D-果糖(標準品)英文名: Acid Green A鋅指蛋白IKAROS抗體包裝500g
D-四氫藥根堿(標準品)英文名: Indocyanine Green免疫球蛋白j鏈抗體包裝1g
D-松(標準品)英文名: Indigotin5-三磷肌受體1抗體包裝5g
DL-薄荷(標準品)英文名: Methyl blue5-三磷肌受體2抗體包裝1g
Euojaponine D英文名: Evans BlueDNA結合抑制因子3抗體包裝100g
Eupeasaponin I英文名: Trypan Blue誘導協同激分子配體CD275抗體包裝25g
ATCC10248=LMG2216資源名稱: 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌 質量規格:HPLC>98%,標準品亮基肽3試劑盒8-姜;8-Gingerol
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>99%,BR鏈激試劑盒6-姜;6-Gingerol
楊鏈格孢Alternaria│populi 質量規格:>98%,標準品連蛋白試劑盒2-金剛烷;2-Adamantanol
結合態淀粉合成酶(GBSS)測試盒50管/48樣木犀青霉 3-苯乙炔硫氧化還原蛋白Elisa
葡萄球屬 3-乙炔線粒體呼吸鏈復合物IElisa
丁香假單胞 二基硅烷線粒體呼吸鏈復合物IIElisa
馬來西亞鏈霉 3,6-壬二烯(異構體的混合物)線粒體呼吸鏈復合物IIIElisa
鮑氏桑黃 2-乙炔苯線粒體呼吸鏈復合物IVElisa
黃曲霉 5-溴-2-氟吡啶總抗氧化能力Elisa
大豆慢生根瘤 2,5-二溴三氟甲苯超氧陰離子Elisa
漢遜德巴酵母 3-羥基異喹啉總蛋白Elisa
糙孢曲霉 芐基二苯基膦總蛋白Elisa
鏈格孢 三環戊基膦核孤兒受體4A1Elisa
貝形側耳、鷹翅 化鈀9-順式環氧類胡蘿卜雙加氧Elisa
考克氏 對酸甲酯9-順式環氧類胡蘿卜雙加氧Elisa
構巢曲霉 硫酸鈰水合物內源Elisa
產氨棒桿 L(-)-阿洛糖β-胡蘿卜羥化Elisa
核盤 Fmoc-N'-三氟乙酰基-L-賴擴展蛋白Elisa