DTT溶液公司正在銷售的產品：Anti-SERPINA11 Antibody人抗組蛋白抗體
Anti-SERINC3 Antibody抗髓鞘少樹突膠質糖蛋白(人)
Anti-SERPINA1 Antibody人晶體蛋白α
Anti-SERPINB3 Antibody大鼠C反應蛋白
Anti-SERPINB4 Antibody小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB
Anti-SERPINE1 Antibody大

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：RNA溶液

儲存條件：—20℃,12個月

用途：是巰基化DNA的還原劑和去保護劑,可以用于還原蛋白質中二硫鍵。

注意事項：無菌溶液,經過濾除菌處理。Dithiothreitol簡稱DTT,是一種小分子有機還原劑,其還原狀態下為線性分子,被氧化后變為包含二硫鍵的六元環狀結構。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

嗜熱鏈球菌磷化谷受體1抗體Human MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit紅生成受體(EPOR)

Aquibacillus halophilus磷化谷受體1抗體Human MYD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88) ELISA Kit紅生成(EPO)

角鱗灰鵝膏菌神經束蛋白186抗體Human KLK10/NES1(Kallikrein-10) ELISA Kit紅膜蛋白(EMP)

鐮孢菌磷化泛連接NEDD4-2抗體Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit紅激因子(ESF)

泡囊短波單胞菌磷化核因子p50/k基因結合核因子抗體Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)

溜曲霉磷化谷受體1抗體Human MFGE8(Lactadherin) ELISA Kit亨廷頓相關蛋白1(HAP1)

酵母菌類固受體激活蛋白2抗體Human MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit黑瘤衍生亮鏈額外核因子(MLZE)

緊密青霉胚胎干關鍵蛋白抗體Human MYD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88) ELISA Kit黑色抗體(MC Ab)

枯草芽孢桿菌核小體組裝蛋白1抗體Human Mer/MERTK(Tyrosine-protein kinase Mer) ELISA Kit黑色激(MSH)

葡萄座腔菌N-鈣粘附分子抗體Human KLK10/NES1(Kallikrein-10) ELISA Kit黑色濃縮激(MCH)

釀酒酵母核受體輔助抑制因子1抗體Human PIM-1(Serine/Threonine-protein Kinase Pim-1) ELISA Kit黑色瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)

單色革蓋菌腎小球粘附分子受體抗體Human C-ERC(Mesothelin) ELISA Kit黑色瘤相關抗原D4(MAGED4/MAGED4B)

鹽古桿菌巢蛋白/神經上皮干蛋白抗體Human KLK6(Kallikrein-6) ELISA Kit黑色瘤活性抑制蛋白(MIA)

蒂莫內馬賽菌巢蛋白/神經上皮干蛋白抗體Human SERPINA4(Kallistatin) ELISA Kit黑色瘤標記物(MART/Melan-A)

黑芝蛋白激錨定蛋白抗體Human KIM-1(Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit核轉錄因子κBp65(NFκBp65)

枯草芽孢桿菌絲或半胱蛋白水解抑制蛋白1抗體Human SCFR/c-Kit(Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit核轉錄因子κB(NFκB)

同溫層芽孢桿菌Bacillus│stratosphericus 質量規格：>99%,BR，可用于培養大黃

海綿假單胞菌Pseudomonas│pachastrellae 質量規格：HPLC>98%,標準品大黃

蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規格：>98%,BR大黃
DTT溶液Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit  小鼠胰淀su規格： 48T

Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit  小鼠游離三碘jia狀腺原氨suan規格： 48T

LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit  小鼠白三烯C4規格： 48T

Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit  小鼠細胞色suC規格： 48T

FT4(Mouse Free Thyroxine) ELISA Kit  小鼠游離jia狀腺su規格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。