化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 25管/24樣 |
產品貨號 | AS6321184 |
商品介紹：
測定意義： AAT是一個多功能蛋白大家族，主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應，在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。 測定原理： AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇，釋放的CoA還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。 自備儀器和用品： 研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
三肉豆蔻甘油酯英文名： 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid生長分化因子3抗體包裝250g
三葉甙；三葉苷（標準品）英文名： Pyranin磷化糖原合激3β抗體包裝25g
桑白皮（標準品）英文名： SulfonfluoresceinG蛋白偶聯受體1抗體包裝5g
桑根L英文名： N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β1抗體/鳥核苷結合蛋白β亞基1包裝100mg
桑根皮英文名： N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β3抗體/鳥核苷結合蛋白β亞基3包裝25ml
桑根H英文名： Sodium 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate鳥苷還原2抗體包裝1g
桑黃英文名： Tetrabromofluorescein Potassium SaltG蛋白偶聯受體γ12抗體包裝5g
桑寄生（標準品）英文名： 2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體包裝100g
桑皮苷C(標準品)英文名： 3,4,5,6-TetrachlorofluoresceinG蛋白α亞單位蛋白Q抗體包裝25g
桑皮苷F英文名： Erythrosine B生長抑制DNA損傷基因GADD45β抗體包裝5mg
桑皮A英文名： Crystal Violet Nonahydrate生長抑制蛋白22抗體（基化控制J蛋白）包裝25g
桑皮E英文名： 2-Aminoperimidine HydrobromideG蛋白偶聯受體39抗體包裝5g
桑皮H英文名： CPC Monohydrate (=Cetylpyridinium Chloride Monohydrate)橋尾蛋白抗體包裝1g
桑色(標準品)英文名： Thymolphthalein Complexon半乳糖凝集8抗體包裝1g
桑椹（標準品）英文名： Calcein Blue糖磷脂酰肌錨定蛋白137抗體包裝5g
布雷絲枝霉Chaetocladium│brefeldii 質量規格：HPLC>98%,標準品黏多糖/糖聚糖L-酪;L-Tyrosine
產黃青霉Penicillium│chrysogenum 質量規格：≥99.0%,BR,可用于培養腦鈉/腦鈉尿肽試劑盒賴;L-Lysine
雙環林地蘑菇Agaricus│placomyces Peck 質量規格：HPLC≥98%,標準品腦啡肽試劑盒柳穿魚黃;Pectolinarigen
酰基轉移酶（AAT）測試盒25管/24樣pDC316 2-(乙基)苯IaElisa
云芝 1,4-二芐氧基苯拓撲異構10Elisa
灰樹花孔 3-（二乙基）-1，2-二金黃色葡萄球腸DElisa
土壤薄層 畢魯間隙連接蛋白43Elisa
總狀毛霉 4-甲基-N-苯基苯乙二ⅠElisa
Cerrena unicolor 4-二甲氨基甲狀腺反應基因Elisa
薄層屬 2--3,6-二氟芐溴Tolloid樣蛋白1Elisa
白僵 4-乙基腫瘤調節蛋白1Elisa
旋絲毛殼 2,6-二-7-脫氮腫瘤調節蛋白Elisa
黃白生叢赤殼 4-溴甲酯硬纖毛蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 2-基固類生成因子1Elisa
尼泊爾正青霉 雙三氟磺酰亞鋰肽基精脫亞氨Elisa
嘴突凸臍蠕孢 L-(-)-蘋果酸二甲酯ⅪaElisa
枯草芽孢桿 衣康酸二甲酯IXaElisa
塔賓曲霉 3,4-二氨基噻吩XIIIaElisa
化工儀器網