詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
甘油苯酚封片劑 | 10ml | FS-R7253 |
產品分類:免疫組化
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:水溶性封固劑,適用于封固藻類或其他不能進行脫水的柔軟組織材料。
注意事項:主要由甘油、苯酚等組成。如果需要長期保存都要用油漆或者中性樹膠進行封邊,否則時間長了容易吸水或干燥,使材料變壞。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
中慢生華癸根瘤菌γ-微管蛋白GCP6抗體Human TMCC1 ELISA Kit大鼠尿微量白蛋白(MAU/ALB)免疫試劑盒
黃桿菌β-葡萄糖苷1抗體Human TMC1 ELISA Kit大鼠尿相關蛋白C(UreC)免疫試劑盒
黑木耳甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體Human TMCC2 ELISA Kit大鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒
大孢枝孢菌15號染色體開放閱讀框58抗體Human TMCO6 ELISA Kit大鼠尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒
大羽須瑚菌淀粉結合域蛋白1抗體Human TMED3 ELISA Kit大鼠尿激(UK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌延伸因子G1抗體Human TMED2 ELISA Kit大鼠尿苷二磷葡萄糖轉移2(UGT2)免疫試劑盒
大腸埃希菌β葡萄糖苷2抗體Human TMEM199 ELISA Kit大鼠尿苷二磷葡萄糖轉移1(UGT1)免疫試劑盒
冬蟲夏草β葡萄糖苷3抗體Human TMED4 ELISA Kit大鼠鳥酰轉移(OCT)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬膠質母瘤相關蛋白GBAS抗體Human TMEM201 ELISA Kit大鼠黏著斑蛋白(VCL)免疫試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌紅糖苷α1抗體Human TMEM213 ELISA Kit大鼠黏多糖/糖聚糖免疫試劑盒
鮮綠青霉G蛋白結合蛋白1抗體Human TMEM208 ELISA Kit大鼠腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)免疫試劑盒
黃褐色牛桿菌G蛋白結合蛋白4抗體Human TMEM214 ELISA Kit大鼠腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌G蛋白結合蛋白6體Human TMEM231 ELISA Kit大鼠腦紅蛋白(NGB)免疫試劑盒
Pseudoclavibacter caeni Srinivasan鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體Human PMCH(Pro-MCH) ELISA Kit大鼠腦啡肽(ENK)免疫試劑盒
異常漢遜酵母鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體Human TMEM25 ELISA Kit大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)免疫試劑盒
粟酒裂殖酵母鳥苷環(huán)化激活蛋白3抗體Human TMEM27 ELISA Kit大鼠內脂(visfatin)免疫試劑盒
放射形根瘤菌Rhizobium│radiobacter 質量規(guī)格:分析標準品桑皮苷A
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質量規(guī)格:分析標準品桑辛
: 44605資源名稱: 分枝桿菌 質量規(guī)格:分析標準品,用于高通量質譜,99.9995%丹參B酯
甘油苯酚封片劑SP-A ELISA Kit 大鼠肺表面活性物質相關蛋白A規(guī)格: 48T
CC16 ELISA Kit 大鼠克拉拉細胞蛋白規(guī)格: 48T
EPI ELISA Kit 大鼠腎上腺su規(guī)格: 48T
MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓過氧化物mei特異性抗中性粒細胞胞質IgG規(guī)格: 48T
C3 ELISA Kit 大鼠補體蛋白3規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。