化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品分類：細胞其他
儲存條件：4℃,6個月
用途：用于兩棲類動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織。并維持離體組織的正常生理功能。
注意事項：主要由氯化鈉、氯化鎂、磷酸鹽、氯化鈣、葡萄糖、HEPES組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
改良臺氏液 | 500ml | FS-R6599 |
配制與標(biāo)定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
1-羥基-3,4,5-三氧山（標(biāo)準(zhǔn)品） Ammonium acetate雌激誘導(dǎo)基因121蛋白抗體包裝100g
10-姜（標(biāo)準(zhǔn)品） Cellulose, Microcrystalline內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體包裝25g
10-羥基癸（標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-Lactose, monohydrate骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體包裝500g
10-羥基癸烯,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium chloride, dihydrate吞噬運動蛋白1抗體包裝100g
10-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethylene glycol酪蛋白激受體A10抗體包裝25g
10-脫乙酰巴亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Magnesium sulfate, heptahydrate腸道病71型/手足口病病抗體包裝5g
11(α)氧基柴胡皂苷F Glucozyme轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體包裝100g
11-O-羅漢果苷V(標(biāo)準(zhǔn)品) PEG 4000酪蛋白激B3抗體包裝25g
11-O-異丁酰基-12-O-乙酰基甘元B-3-... Potassium phosphate, dibasic, anhydrous磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體包裝500g
11-羥基柳杉（標(biāo)準(zhǔn)品） Formamide酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體包裝10g
11-羰基-β-乙酰乳香（標(biāo)準(zhǔn)品） PEG 8000空通氣孔樣蛋白2抗體包裝50g
12-Epinapelline Lithium chloride同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體包裝100g
12-O-Tiglylphorbol-13 –isob... Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate磷化外信號調(diào)節(jié)激5抗體包裝25g
13-氧-(9E,11E)-十八碳二烯 TTC,TTZ,Tetrazolium RedCD39樣蛋白1抗體包裝5g
14α-羥基Sprengerinin C Sulfamethoxypyridazine真核翻譯起始因子5抗體包裝25g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BR級，可用于培養(yǎng)，純度99%以上,三合物,USP30肽聚糖識別蛋白L試劑盒蛇床子;Osthole
白色產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│albochromogenes 質(zhì)量規(guī)格：含量測定肽聚糖試劑盒升麻;Cimifugin
新月彎孢Curvularia│lunata 質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.0肽基脯酰順反異構(gòu)試劑盒圣草次苷;Eriocitrin
改良臺氏液SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 熒光標(biāo)記抗豬水腫（O139）IgG
Slug/FITC 熒光標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子SlugIgG
Smac/DIABLO/FITC 熒光標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白IgG
phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光標(biāo)記化SMADIgG
Smad 1/FITC 熒光標(biāo)記Smad 1IgG
Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1IgG
Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC 熒光標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5IgG
Smad2/3 /FITC 熒光標(biāo)記Smad 2/3IgG
化工儀器網(wǎng)