胃蛋白酶抗原修復(fù)液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：大鼠III型前膠原氨基端肽(PIIINP)試劑盒Anti-OGN Antibody大鼠Ⅻ
大鼠孕/孕酮(Pg)試劑盒Anti-ODF2 Antibody人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體
大鼠胰島素原(PI)試劑盒Anti-OLFML2B Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4
大鼠P選擇素(SELP)試劑盒Anti-OLFML2A Ant

產(chǎn)品分類(lèi)：免疫組化

儲(chǔ)存條件：—20℃,12個(gè)月

用途：抗原修復(fù)緩沖液

注意事項(xiàng)：主要由胃蛋白酶溶解于稀酸溶液中。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

殼菌同源盒基因HOXA3蛋白抗體Human STK32B ELISA Kit大鼠肝X受體β(LXRβ)免疫試劑盒

谷棒桿菌同源盒基因HOXA4蛋白抗體Human STK33 ELISA Kit大鼠肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒

活潑微球菌同源盒基因HOXA6蛋白抗體Human STK33 ELISA Kit大鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒

翹鱗香菇同源盒基因HOXA7蛋白抗體Human STK32B ELISA Kit大鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒

鏈格孢羥基類(lèi)固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體Human STK32C ELISA Kit大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷IA(MAN1A1)免疫試劑盒

白腐菌血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體Human STEAP3 ELISA Kit大鼠甘膽(CG)免疫試劑盒

粘絲膜菌血紅結(jié)合蛋白1抗體Human STK36 ELISA Kit大鼠/甘(GAL)免疫試劑盒

霍氏格里蒙特氏菌血紅蛋白α抗體Human STIM1 ELISA Kit大鼠甘免疫試劑盒

澳型核果褐腐病菌結(jié)合球蛋白β抗體Human STIM2 ELISA Kit大鼠干因子受體(SCFR)免疫試劑盒

好食脈孢菌海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human STARD3NL ELISA Kit大鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒

動(dòng)物雙歧桿菌組蛋白H2AZ抗體Human STEAP4(STEAP family member 4) ELISA Kit大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白11(IP-11/CXCL11)免疫試劑盒

巴氏醋桿菌羅旺亞種熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體Human STARD5 ELISA Kit大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒

光帽磷傘HEATR2蛋白抗體Human STIP1 ELISA Kit大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒

芽胞桿菌鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體Human STEAP3 ELISA Kit大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒

尖鐮孢黃瓜專(zhuān)化型（黃瓜枯萎病菌）麻疹病血凝抗體Human STEAP2 ELISA Kit大鼠鈣腔蛋白(CALU)免疫試劑盒

多布克魯維酵母同源盒蛋白HOXC5抗體Human STIM1 ELISA Kit大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒

: Blackburn資源名稱(chēng): 鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC ,>98.5%(GC)沒(méi)食子兒茶

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC, ≥99.5% (GC)芒柄花苷

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│tetraodonis 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5%(GC)豆甾
胃蛋白酶抗原修復(fù)液SP ELISA Kit  大鼠P物質(zhì)規(guī)格： 48T

AFU ELISA Kit  大鼠αL巖藻糖mei規(guī)格： 48T

TPO ELISA Kit  大鼠jia狀腺過(guò)氧化物mei規(guī)格： 48T

PI ELISA Kit  大鼠胰島su規(guī)格： 48T

大鼠抗IgE受體ELISA Kit  大鼠抗IgE受體規(guī)格： 48T