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內源性酶抑制劑

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更新時間:2022-07-28 15:05:55瀏覽次數:378

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 100ml
貨號 FS-R7215 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7215
內源性酶抑制劑公司正在銷售的產品:人內皮型一氧化氮合酶(NOS3/eNOS)試劑盒Anti-MARCKS Antibody柯薩奇病 IgG Ⅰ(間接法二步法)
人凝血因子VII(F7)試劑盒 Anti-MARK1 Antibody柯薩奇病 IgM Ⅰ(間接法二步法)
人凝血因子IX(F9)試劑盒Anti-MARK3 Antibody柯薩奇病 IgG Ⅱ(間接法二步法)
人凝血因子X(F10)試劑

詳細介紹

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

內源性酶抑制劑

100ml

FS-R7215

產品分類:免疫組化

儲存條件:室溫,12個月

用途:冰凍切片時,抑制內源性酶(過氧化物酶)

注意事項:主要由抑制劑、防腐劑、PBS配制。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

艾登短芽孢桿菌半乳糖神經酰抗體Human XPA ELISA Kit雞白介8(IL-8)免疫試劑盒

節桿菌磷化葡萄糖合成1抗體Human YEATS2 ELISA Kit雞白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒

雷州灣芽孢桿菌半乳糖凝集3抗體Human XPNPEP1 ELISA Kit雞白介6(IL-6)免疫試劑盒

亮白曲霉生長因子受體結合蛋白7抗體Human YOD1 ELISA Kit雞白介4(IL-4)免疫試劑盒

鞘單胞菌屬糖基轉移1結構域1抗體Human YES1 ELISA Kit雞白介3(IL-3)免疫試劑盒

變異居白蟻菌G蛋白偶聯受體LGR7蛋白抗體Human XRCC5/Ku80(X-ray repair cross-complementing protein 5) ELISA Kit雞白介2(IL-2)免疫試劑盒

干酪乳桿菌G蛋白偶聯受體MRGX2蛋白抗體Human XRCC4 ELISA Kit雞白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

少根根霉東京變種G蛋白偶聯受體RDC1蛋白抗體Human XRCC2 ELISA Kit雞白介18(IL-18)免疫試劑盒

類阿達青霉G蛋白偶聯受體TAS1R1蛋白抗體Human PDE1C(Calcium/calmodulin-dependent 3′,5′-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C) ELISA Kit雞白介17(IL-17)免疫試劑盒

膠孢G蛋白偶聯受體TGR7蛋白抗體Human XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis ) ELISA Kit雞白介15(IL-15)免疫試劑盒

田菁根瘤菌G蛋白偶聯受體GPR157蛋白抗體Human XRN1 ELISA Kit雞白介12(IL-12/70)免疫試劑盒

橙黃色擲孢酵母G蛋白偶聯受體GPR176蛋白抗體Human XRN2 ELISA Kit雞白介10(IL-10)免疫試劑盒

嗜糖黃桿菌G蛋白偶聯受體GPR10蛋白抗體Human MTF1(Metal regulatory transcription factor 1) ELISA Kit雞白介1(IL-1)免疫試劑盒

皺褶假絲酵母G蛋白偶聯受體C5L2蛋白抗體Human XIRP2 ELISA Kit雞γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

托魯斯山鏈霉菌G蛋白偶聯受體EX33蛋白抗體Human XYLT1 ELISA Kit雞β內酰(β-lactamase)免疫試劑盒

鏈卵菌屬G蛋白偶聯受體GPR102蛋白抗體Human YME1L1 ELISA Kit雞β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種Lactococcus│lactis subsp. lactis 質量規格:Viscosity Grade 10010-去乙酰紫杉;7-表-去乙酰基紫杉

黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質量規格:Viscosity Grade 150多烯紫杉

球形賴芽孢桿菌Lysinibacillus│sphaericus 質量規格:0.97三尖杉寧堿
內源性酶抑制劑D-LDH ELISA Kit   大鼠D-乳suan脫氫mei規格: 48T

TARC/CCL17 ELISA Kit  大鼠胸腺活化調節趨化因子規格: 48T

CH ELISA Kit  大鼠規格: 48T

TG ELISA Kit  大鼠甘油三酯規格: 48T

TG ELISA Kit(human)  人甘油三酯規格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

 


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