產品簡介
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50ml |
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貨號 | FS-R7033 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研 | 貨號 | FS-R7033 |
雞TATA框結合蛋白相關因子13(TAF13)試劑盒Anti-CLDN6 Antibody插頭蛋白M1抗原
雞胱天蛋白酶10(CASP10)試劑盒 Anti-CLDN7 Antibody麻疹病抗原(麻疹病融合蛋白)
雞雌二受體(ER)試劑盒 Anti-CLEC11A Antibo
上海撫生實業有限公司 |
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18201748966 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2022-07-25 16:26:38瀏覽次數:206
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50ml |
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貨號 | FS-R7033 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研 | 貨號 | FS-R7033 |
產品分類:微生物染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:鞭毛染色
注意事項:主要由苯酚、鞣酸、硫酸鋁鉀、結晶紫等組成,染色后菌體和鞭毛呈紫色,菌體染色較深。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
鞭毛染色液 | 50ml | FS-R7033 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
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球形賴芽孢桿菌2號染色體開放閱讀框76抗體Human SBDP 145(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT) ELISA Kit人血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)免疫試劑盒
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泛菌屬卷曲螺旋結構域蛋白120抗體Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) ELISA Kit人血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒
擲抱酵母卷曲螺旋結構域蛋白23抗體Human NGFR(p75 neurotrophin receptor) ELISA Kit人血紅蛋白β亞基(HB-β)免疫試劑盒
黑木耳(植5)卷曲螺旋結構域蛋白89抗體Human RAMP1(Receptor activity-modifying protein 1) ELISA Kit人血紅蛋白α亞基(HB-α)免疫試劑盒
釀酒酵母卷曲螺旋結構域蛋白30抗體Human STATH(Statherin) ELISA Kit人血紅蛋白H(HbH)免疫試劑盒
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BRFc受體樣蛋白3試劑盒黑芥子硫苷一
嗜菌Acidiphilium│sp. 質量規格:>98%,BRFAM172A蛋白試劑盒黃腐
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質量規格:>98%,BRE選擇試劑盒華蟾它靈
鞭毛染色液cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白meiK規格: 48T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 人骨形成蛋白規格: 48T
RBP-4(Human Retinol binding protein 4) ELISA Kit 人shi黃chun結合蛋白4規格: 48T
PLP(Human proteolipid protein) ELISA Kit 人蛋白脂質蛋白規格: 48T
VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃suan規格: 48T