化工儀器網
詳細介紹
產品分類：核酸雜交
儲存條件：室溫,6個月
用途：核酸雜交后漂洗溶液
注意事項：主要由SSC、曲拉通-100、滅菌水等組成,離子強度較低。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
核酸雜交漂洗液 | 500ml | FS-R7401 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
糖化酵母巨噬炎癥蛋白2（ GRＯβ）抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性OX40L(sOX40L)
側耳金屬硫蛋白抗體Human FUT6(Alpha-(1,3)-fucosyltransferase) ELISA Kit可溶性E選擇(sE-selectin)
綠色木霉磷化微管相關蛋白2抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性Endoglin(sENG/sCD105)
芽孢桿菌屬內皮MMRN1蛋白抗體Human DEFB1(Beta-defensin 1) ELISA Kit可溶性CD86(B7-2/sCD86)
硬毛栓孔菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human CCBL1(Kynurenine–oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit可溶性CD44變體9(sCD44-v9)
拜氏色鹽桿菌磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體Human AVP(Vasopressin-neurophysin 2-copeptin) ELISA Kit可溶性CD40配體(sCD40L)
多根硬皮馬勃磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體Human DEFB4A(Beta-defensin 4A) ELISA Kit可溶性CD38(sCD38)
釀酒酵母磷化髓樣白血病-1抗體Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit可溶性CD30配體(sCD30L)
平菇磷化雙微體2癌基因抗體Human SLC8A1(Sodium/calcium exchanger 1) ELISA Kit可溶性CD28(sCD28)
芽枝狀枝孢磷化肌增強因子2抗體Human ESRRG(Estrogen-related receptor gamma) ELISA Kit可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)
小馬勃磷化肌增強因子2抗體Human SLC11A2(Natural resistance-associated macrophage protein 2) ELISA Kit可溶性CD21(CR2/sCD21)
溶藻弧菌磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit可溶性CD163分子(sCD163)
蟬花*磷化微管相關蛋白2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD146分子(sCD146)
哈茨木霉絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit可溶性CD14(sCD14)
閃光須霉磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit可溶性CD105(sCD105)
腸炎沙門氏菌磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD100(sCD100)
海科貝特氏菌Cobetia│marina 質量規格：95%,BR齊墩果
白地霉Geotrichum│candidum 質量規格：1:3000,BR青藤堿
大腸埃希氏菌DH5α/797（797-PknB）Escherichia│coli 質量規格：≥50 U/mg,sigma 原裝雙氫
核酸雜交漂洗液CGRP(Mouse calcitonin gene related peptide) ELISA Kit 小鼠降鈣su基因相關肽規格： 48T
MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit 小鼠胃動su規格： 48T
SS(Mouse Somatostatin) ELISA Kit 小鼠生長抑su規格： 48T
Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit 小鼠血纖蛋白原規格： 48T
PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit 小鼠血小板活化因子規格： 48T
化工儀器網