六胺銀染色液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：綿羊成纖維生長(zhǎng)因子受體底物3(FRS3)試劑盒Anti-CYP2U1 Antibody巨噬炎癥蛋白2抗原
綿羊血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)試劑盒 Anti-CYP39A1 Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原
綿羊β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒 Anti-CYP4A11 Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原
綿羊β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-4

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：微生物染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,6個(gè)月

用途：用于真菌(馬爾尼菲青霉菌)和卡氏肺囊蟲(chóng)類(lèi)生物的染色

注意事項(xiàng)：甲醛固定，石蠟包埋。真菌、肺囊蟲(chóng)、黑色素染為棕黑色或黑色，背景為橙黃色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

杏鮑菇磷化p21蛋白抗體Human IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit人去乙酰化Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)免疫試劑盒

肺形側(cè)耳磷化p21蛋白抗體Human IL-19(Interleukin 19) ELISA Kit人去乙?；疭irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體Human IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit人去乙?；疭irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化p21蛋白抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人去乙酰化Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Human HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit人去乙?；疭irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫試劑盒

小紅酵母CLEC2D蛋白抗體Human HSP-70(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit人去乙?；疭irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌富含半胱與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體Human HSPβ6/HSP-20(Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit人去乙?；囸I激(dGHRL)免疫試劑盒

球形節(jié)桿菌醌氧化還原樣蛋白1抗體Human HSPG(Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)抗體免疫試劑盒

米曲霉銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human HYOU1(Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒

山羊葡萄球菌濃縮2復(fù)合亞基D3抗體Human IFABP/FABP2(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit人去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒

克魯斯假絲酵母磷化分裂周期蛋白6抗體Human IL-35(Interleukin 35) ELISA Kit人趨化因子受體3(CCR3)免疫試劑盒

泡盛曲霉磷化周期依賴(lài)激2抗體Human IFN-α(Interferon Alpha) ELISA Kit人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試劑盒

薄層菌碳酐12抗體Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit人趨化因子26(CCL26)免疫試劑盒

釀酒酵母泛載體蛋白R2抗體Human IgA1(Immunoglobulin A1) ELISA Kit人趨化因子2(CXCL2)免疫試劑盒

粘附分子3抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人趨化因子(FK)免疫試劑盒

仙芝(靈芝屬之一種)整合相關(guān)蛋白CD47Human INSL5(Insulin Like Protein 5) ELISA Kit人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)免疫試劑盒

豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCC1q/TNF相關(guān)蛋白3試劑盒對(duì)氧基

聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRB因子試劑盒丁香油

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質(zhì)量規(guī)格：BSB受體相關(guān)蛋白31試劑盒橙皮油內(nèi)酯
六胺銀染色液PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit  人磷酯meiC規(guī)格： 48T

Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit  人酪氨suan激mei2規(guī)格： 48T

ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit  人白介su1β轉(zhuǎn)換mei規(guī)格： 48T

ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit  人整合su連接激mei1規(guī)格： 48T

CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit  人細(xì)胞色suP450c21B/21-羥化mei規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。