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詳細介紹
產品分類：酶抑制劑
儲存條件：—20℃,避光,12個月
用途：蛋白酶抑制劑
注意事項：主要由亮抑蛋白酶肽、胰凝乳蛋白酶抑制劑和抑胃肽酶組成。稀釋100倍后使用。工作濃度為5-10umol/L。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
CLP蛋白酶抑制劑混合液 | 1ml | FS-R7512 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
球孢白僵菌堿性蛋白1樣蛋白抗體Anti-CYP11A1 Antibody正五聚蛋白3(PTX3)
燼灰土類芽孢桿菌E3泛蛋白連接144A抗體Anti-CYP11B1 Antibody正輔因子4(PC4)
樹舌靈芝(平蓋靈芝)轉錄調控因子RFX4抗體Anti-CYP11B1/C11B2/CYP11B2 Antibody整合連鎖激(ILK)
枯草芽孢桿菌Rab溶體相互作用蛋白樣2抗體Anti-CYP19A1 Antibody整合關聯蛋白(IAP)
大腸埃希氏菌12號染色體開放閱讀框52抗體Anti-CYP17A1 Antibody整合β8(ITGβ8)
Maritalea myrionectae梅克爾憩室綜合征相關蛋白5抗體Anti-CYP19A1 Antibody整合β7(ITGβ7)
杰丁畢赤酵母β1,3-N-乙酰糖基轉移抗體Anti-CYP17A1 Antibody整合β6(ITGβ6)
白囊耙齒菌RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位1抗體Anti-CYP19A1 Antibody整合β5(ITGβ5)
灰略紅鏈霉菌RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位2抗體Anti-CYP1A1 Antibody整合β4(ITGβ4)
鮑氏桑黃維甲誘導蛋白1抗體Anti-CYP19A1 Antibody整合β3(ITGβ3)
長野本森頓酵母環指蛋白13抗體Anti-CYP1A1 Antibody整合β2(ITGβ2)
米曲霉環指蛋白15抗體Anti-CYP1A2 Antibody整合β1(ITGβ1)
蠟狀芽孢桿菌金屬蛋白抑制因子RECK抗體Anti-CYP1A1 Antibody(PB0573)整合αV(ITGαV)
羅爾細薄菌視黃受體應答蛋白3抗體Anti-CYP1B1 Antibody(PB0575)整合αM(ITGαM)
Phoma medicaginis var. medicaginis視黃受體應答蛋白1抗體Anti-CYP21A1 Antibody整合αD(ITGαD)
雙孢畢赤酵母環指蛋白128抗體Anti-CYP24A1 Antibody整合α9(ITGα9)
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格：0.98
鏈格孢Alternaria│sp. 質量規格：0.99
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格：>98%,BR
CLP蛋白酶抑制劑混合液phospho-AR ( p-Ser580)/FITC 熒光su標記磷suan化雄激su受體IgG規格： 0.2ml
AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC 熒光su標記磷suan化雄激su受體IgG規格： 0.2ml
AR Alpha1/FITC 熒光su標記α1腎上腺su能受體IgG規格： 0.2ml
ARC/FITC 熒光su標記ARCIgG規格： 0.2ml
ARF6/FITC 熒光su標記ADP核糖基化因子6IgG規格： 0.2ml
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