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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
KRBH緩沖液 | 500ml | FS-R6608 |
產(chǎn)品分類：細(xì)胞其他
儲存條件：4℃,3個月
用途：全稱為Krebs-Ringer bicarbonate HEPES buffer,主要由HEPES、氯化鈉、碳suan氫鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈣、硫suan鎂等組成。用于動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織。并維持離體組織的正常生理功能。
注意事項：無菌溶液，主要防止微生物污染。
配制與標(biāo)定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
levatin Ammonium oxalate hydrateEFHD1蛋白抗體包裝5g
Lup-20(29)-en-28-oic acid, ... Adenosine-5'-monophosphate, free acid突觸結(jié)合蛋白2抗體包裝100g
Monnieriside G Aluminum sulfate, hexadecahydrate核苷焦磷2抗體包裝25g
Multicaulisin Glucose-6-phosphate dehydrogenase長鏈烯脂酰化抗體包裝25g
N-阿魏酰真蛸 Malate dehydrogenase神經(jīng)元，肌肉特異性烯化抗體包裝5g
N-芐基-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰 N-Hydroxysuccinimide內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體包裝1g
N-芐基-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰 Gallic acid monohydrate發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體（乙致畸因子）包裝25g
N-芐基十六烷酰 Gallic acid monohydrate豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K99抗體包裝5g
N-反式-阿魏酰基酪 a-Ketoglutaric acid, disodium salt, dihydrateα內(nèi)磺肽抗體包裝100g
N-反式-對-香豆酰基去辛弗林 Calcium hydroxide磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝25g
N-反式-對香豆酰酪(標(biāo)準(zhǔn)品) HPC, hydroxypropyl cellulose表皮生長因子樣激受體1抗體包裝500g
N-基野靛堿（標(biāo)準(zhǔn)品） L(+)Sodium tartrate dihydrateCREB結(jié)合蛋白p300抗體包裝1g
Nudicaucin A Pyridoxamine, dihydrochlorideEB病LMP-2A蛋白抗體包裝5g
Nudicaucin B Sodium salicylateEB病核抗原1抗體包裝25g
Odoratisol A CAPS, sodium salt磷化雌激受體β抗體包裝5g
煙草根黑腐病菌Thielaviopsis│basicola 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR性磷試劑盒肉豆蔻木脂;Myrislignan
護(hù)岸植物紅樹桿菌Mangrovibacter│plantisponsor 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品性富亮核磷蛋白32家族成員E試劑盒L-肉堿;L(-)-Carnitine
: AS3.2783資源名稱: 宇佐曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%性成纖維生長因子試劑盒20(S)-原人參二;Protopan
KRBH緩沖液STAT4 /FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4IgG
Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC 熒光標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4IgG
STAT5/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)IgG
STAT6 /FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6IgG
STEAP1/FITC 熒光標(biāo)記前列腺跨膜上皮抗原1IgG
StAR/StARD1/FITC 熒光標(biāo)記促黃體激誘導(dǎo)蛋白IgG
STK/CK I Alpha/FITC 熒光標(biāo)記屬絲/蘇氨蛋白質(zhì)激IgG
STK/CK II Alpha/FITC 熒光標(biāo)記絲/蘇氨蛋白質(zhì)激IgG
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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