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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321211 |
商品介紹：
測定意義SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。測定原理淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值，一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。需自備的的儀器和用品可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
Prosapogenin CP6英文名： MagnesonII白介16抗體包裝1g
Raddeanoside 20英文名： Ferron抑制βB/Inhibin β B抗體包裝250mg
Sapindoside A英文名： 3-Methyl-2-benzothialinone白介11抗體包裝1g
Smyrindioloside英文名： Miglitol白介22受體抗體包裝5g
Thonningianin A英文名： Miglitol白介26抗體包裝1g
Tokinolide B英文名： 1-Naphtholphthalein白介-17D抗體包裝25g
Triptonine B英文名： Dapoxetine hydrochloride環(huán)指蛋白217抗體包裝5g
α-倒捻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Dapoxetine hydrochloride白介2抗體(人)包裝1g
α-蒎烯英文名： Fast Black K Salt白介-23受體抗體包裝500mg
α-乳香英文名： Amido black 10B胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
α-石竹烯英文名： Naltrexone hydrochloride白介6受體β抗體IL-6Rβ包裝1g
α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Triphenylarsine oxide干擾-gamma受體1抗體包裝25g
α-香附(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone白介1α前肽/IL-1α前肽抗體包裝5g
α－常春藤皂苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Aloin B整合α11抗體包裝1g
β,β-二基烯酰阿寧（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside胰島生長因子樣家族成員2抗體包裝5g
弗氏志賀菌Shigella│flexneri 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR什曼原蟲試劑盒L-精;L(+)-Arginine
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,可用于培養(yǎng)尿肽試劑盒積雪草;Asiatic acid
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR李斯特菌抗體試劑盒金雀花堿;Cytisine
淀粉分支酶（SBE）測試盒50管/24樣冷溫木克酵母 3-溴苯甲二乙縮琥珀酸脫氫Elisa
泗川假黃單胞 2-溴-5-甲氧基苯甲α-淀粉Elisa
枯草芽孢桿 3--2-甲酸磷酸化組蛋白Elisa
堅強(qiáng)芽孢桿 三氟甲磺鎵豆酸Elisa
植物乳桿 苯氧乙酸烯酯Elisa
炭球 硫酸銣生長Elisa
固氮假單胞 亞硫酸鋅蔗糖合成Elisa
釀酒酵母 BOC-L-羥脯甲酯神經(jīng)酰-1-磷酸Elisa
地衣芽孢桿 2-羥基-2-酮鞘糖脂Elisa
糞產(chǎn)堿桿 氨基三甘單甲脂肪酸去飽和Elisa
大腸埃希氏(大腸桿)* 4-溴-3,5-二N-乙酰葡糖Elisa
芽胞桿 4-氨基-2-嘧啶磷酸核酮糖激Elisa
格氏糖多孢 二乙二雙(對甲苯磺酸酯)神經(jīng)酰Elisa
白僵 α,ω-雙{2-[(3-羧基-1-氧基)氨基]乙基}聚乙二神經(jīng)鞘氨Elisa
枯草芽孢桿 α,ω-雙{2-[(3-羧基-1-氧基)氨基]乙基}聚乙二1磷酸鞘氨Elisa
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