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詳細介紹
產品分類：細胞組分分離
儲存條件：—20℃,避光,12個月
用途：主要用于裂解植物組織，提取樣品中的蘋果酸脫氫酶
注意事項：蘋果酸脫氫酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成蘋果酸的關鍵酶之一，催化蘋果酸和草酰乙酸(OAA)的相互轉化，參與眾多生理代謝途徑如TCA循環C4循環脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等，因此MDH在植物的生長發育中發揮著重要作用，廣泛存在于線粒體、細菌細胞膜上，為三羧酸循環中的一種酶，由于酶的來源不同，其某些性質也不盡相同。MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、?耄???鉩?????蘢????娂蒼????逝
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
蘋果酸脫氫酶提取試劑 | 500ml | FS-R6558 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
萘乙酰(標準品) Oxcarbazepine補體C4b-A蛋白抗體包裝100mg
泊金酯(標準品) Oxcarbazepine磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝1g
泊金酯(標準品) Hypericin磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝5g
泊金乙酯；酯（標準品） D-（+）-Glucopyranose 6-phosphate4號染色體開放閱讀框28抗體包裝100g
爾雌（標準品） D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt 陽離子通道相關蛋白2抗體包裝25g
可地爾（標準品） Azathioprine陽離子通道相關蛋白3抗體包裝5g
可占替諾（煙占替諾）標準品 Barnidipine HCl液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體包裝1g
羅替（標準品） Cefepime Hydrochloride鈣調磷B相關蛋白2抗體包裝1g
麥角林（標準品） Cefepime HydrochlorideCHRAC1蛋白抗體包裝5g
舒（標準品） Loxoprofen sodiumATP依賴的解螺旋抗體包裝1g
莫（標準品） Loxoprofen sodiumX染色體開放閱讀框6抗體包裝5g
莫雜質Ⅰ/2,6-二基-4-（3-基）-... Paeonol硫軟骨2抗體包裝1g
群（標準品） Paeonol碳化合物磺基轉移10抗體包裝5g
群雜質A（標準品） Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine碳化合物磺基轉移11抗體包裝1g
索（標準品） Liranaftate碳化合物磺基轉移12抗體包裝250g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格：HPLC>98%,標準品間粘附分子2試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯
香菇Lentinula│edodes 質量規格：>99%,EP5.0間粘附分子1試劑盒L-鼠李糖;L(+)-Rhamnose
CBS277.70=ATCC22054資源名稱: 森正青霉 質量規格：HPLC>99%,標準品性T淋巴相關抗原4試劑盒松香;Abietic Acid
蘋果酸脫氫酶提取試劑PERK/FITC 熒光標記蛋白激R樣內質網激IgG鈉，無水 AR,99.0%
Phospho-PERK (Thr980)/FITC 熒光標記化蛋白激樣內質網激IgG鈉，無水 99.99% metals basis
peripherin/FITC 熒光標記外周蛋白IgG鋅，二水 AR,99.0%
HSP-27/HRP 辣根過氧化物標記熱休克蛋白27IgG鋅，二水 CP,98.0%
P-fscn1/FITC 熒光標記化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 IgG鋅，二水 99.99% metals basis
PG-C/FITC 熒光標記胃蛋白原CIgG鋅，二水 99.995% metals basis
PGC-1 Alpha/FITC 熒光標記過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1αIgG無水醋鋅 CP,99.0-1.0%
PGE2/FITC 熒光標記前列腺E2IgG2-酰吡啶 98%
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