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電誘導細胞融合試劑盒

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更新時間:2022-07-04 11:56:09瀏覽次數:248

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 20T
貨號 FS-R6396 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6396
電誘導細胞融合試劑盒公司正在銷售的產品:兔囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)試劑盒Anti-CCL4 Antibody含酸突觸相關蛋白相互作用蛋白1抗體
兔抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒 Anti-CCL26 Antibody外周蛋白2抗體
兔蛋白C抑制劑(PCI)試劑盒Anti-CCL3 Antibody區帶蛋白PZP抗體
兔葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)試劑盒 Anti-CCL2

詳細介紹

63.jpg
產品分類:細胞培養

儲存條件  4℃,6個月

用途  利用電誘導細胞融合

注意事項  無菌溶液。其作用原理是先使細胞在在電場中極化成偶極子,并延電力線成串排列,用高強度、短時程的電脈沖擊穿細胞膜,促使細胞發生融合。該細胞融合方法具有無毒、融合頻率高、易控制等優點。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

電誘導細胞融合試劑盒

20T

FS-R6396

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

可溶性CD80(sCD80/B7-1)sCD80/B7-1 ELISA Kitβ1,3半乳糖轉移3抗體包裝25g

可溶性CD80(sCD80)sCD80 ELISA Kit紅陰離子交換蛋白1抗體包裝500g

巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)GM-CSF ELISA Kit腦特定蛋白Brn3B抗體包裝5g

巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)MIP-1α/CCL3 ELISA KitBcl-2同源結構域蛋白抗體包裝100g

巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit骨形態發生蛋白4抗體包裝25g

巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)MCP-1/CCL2 ELISA Kit腦和急性白血病胞漿蛋白抗體包裝5g

膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)GDNF ELISA Kit骨髓基質干抗原2抗體包裝25g

堿性成纖維細胞生長因子9(FGF9)FGF9 ELISA Kit組蛋白相關Bmi1抗體包裝5g

激活A(Activin A)Activin A ELISA Kit癌轉移抑制基因1抗體包裝100mg

活化A(Activin-A)Activin-A ELISA Kit大腦富含鳥苷激相關蛋白抗體包裝5MG

核心蛋白聚糖(DCN)DCN ELISA Kit腦富含膜附著信號蛋白1抗體包裝5g

肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)c-MET/HGFR ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白3抗體包裝1g

分化簇抗原30配體(CD30L)CD30L ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白抗體包裝5g

二肽基肽IV(DPP4/CD26)DPP4/CD26 ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白4抗體包裝1g

二肽基肽4(DPP4/CD26)DPP4/CD26 ELISA Kit炭疽桿菌菌體蛋白抗體包裝5g

磷化蛋白激B抗體干擾α2(IFNα2)Ki16198 is the methyl ester of Ki16425, which is a LPA antagonist and inhibits L
電誘導細胞融合試劑盒EPOR/FITC  熒光標記紅生成受體IgG間溴苯 98%

ER/FITC  熒光標記雌激受體IgG溴烷  99%

ERAB/FITC  熒光標記內質網Aβ相關結合蛋白IgG正丁烷 CP,98%

ERCC1/FITC  熒光標記抗切除修復交叉互補因1IgG對溴苯 99%

ERK1/ERK /FITC  熒光標記絲裂原活化蛋白激1IgG異烷 CP

p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC  熒光標記化絲裂原活化蛋白激1/2IgG異烷  99%

ERK1/2/FITC  熒光標記絲裂原活化蛋白激1/2IgG異烷 ,≥99.8% (GC)

Eph receptor B2/FITC  熒光標記Eph receptor B2IgG2-溴-5-氧苯 98%


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