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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321296 |
商品介紹：
測定意義土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標。測定原理氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細胞呼吸過程中接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈現紅色，在波長485nm處有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。自備實驗儀器及用品篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、漏斗，濾紙、可見分光光度計、玻璃比色皿，冰、蒸餾水、丙酮（不允許快遞，請用戶自備）。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
2-芐基咪唑啉英文名： 2,7-Di-tert-butylfluorene原鈣粘蛋白γA5抗體包裝5g
2-代-5'-乙基酰基腺苷英文名： 9-Fluorenone原鈣粘蛋白γA7抗體包裝1g
2-代腺苷英文名： 9-Fluorenol原鈣粘蛋白γA8抗體包裝5g
2-代腺苷2',3'-縮英文名： 2-Fluorenecarboxaldehyde原鈣粘蛋白γA9抗體包裝1g
2-疊氮-1,3-二-o-三基乙酰-D-赤-鞘英文名： 2-Hydroxy-9-fluorenone原鈣粘蛋白γA11抗體包裝5MG
2-疊氮-1-三基乙酰-D-赤-鞘英文名： 2-Nitrofluorene原鈣粘蛋白γA12抗體包裝1mg
2-疊氮腺苷英文名： 9,9'-Spirobi[9H-fluorene]原鈣粘蛋白β12抗體包裝100g
2--4-去比魯英文名： 2-Aminoanthracene原鈣粘蛋白β3抗體包裝25g
2-腺英文名： 1-Aminoanthracene原鈣粘蛋白γB1抗體包裝5g
2-基-Δ1-醋地孕 (醋地孕雜質)英文名： 9-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB2抗體包裝100g
2-基硫代二磷腺苷英文名： 1-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB4抗體包裝25g
2-基硫代二磷腺苷英文名： 2-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB6抗體包裝500g
2-酰-3,17β-O-二(氧基)雌二英文名： 9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene原鈣粘蛋白γC3抗體包裝100g
2-肼基腺苷英文名： 9-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γC4抗體包裝25g
2-腺苷 5'-單磷雙三乙鹽英文名： 2-Bromo-9,10-diphenylanthracene磷蛋白聚糖PTPRZ抗體包裝5g
加州鏈霉菌Streptomyces│californicus 質量規格：≥97%,BR谷谷草轉2，線粒體試劑盒乙酰;純品型;標準品;有證書
鏈格孢菌Alternaria│alternata (Fr.) Keissl. 質量規格：HPLC≥98%，標準品谷-半胱連接調節亞基試劑盒蔗糖;純品型;標準品;有證書
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質量規格：>98%,BR谷[NMDA]受體亞基ε-2試劑盒維生D3;純品型;標準品;有證書
土壤脫氫酶(SDHA)測試盒50管/48樣微紅帚霉 山梨酸鈣鈣調依賴性蛋白激2Elisa
加鏈霉 1,3-二(2,4-二氨基苯氧基)烷鹽酸鹽5-羥色受體1AElisa
隆德假單胞 2,4-二-6,7-二氫噻吩[3,2-D]嘧啶胰蛋白Elisa
大腸埃希氏 (2R,4R)-4-甲基-2-甲酸15S-羥化二十碳四烯酸Elisa
MG1655 ΔendA ΔrecA (DE3) 3-甲基-8-喹啉磺酰15-羥化二十碳四烯酸Elisa
茯苓 2-氨基-5-三氟鑰孔蟲戚血藍蛋白IgG抗體Elisa
耐熱裸囊 7-靛紅布魯氏抗體Elisa
釀酒酵母 3,3-二苯基酸乙酯嗜酸性選擇性趨化因子2Elisa
乳酸計數模擬乳粉質控樣品 3,4-二氨基苯磺酸骨成型蛋白1Elisa
大腸埃希 4-(4-甲基哌-1-基)苯酸頻哪酯脯羥化Elisa
局限青霉 (R)-(+)-2-酸甲型肝炎病IgG抗體Elisa
短波單胞屬 4-溴甲基-2-甲氧基甲酯顆粒KElisa
小單孢 扎托心肌型肌酸激同工MBElisa
谷棒桿 4-羥基-2-氨基苯并噻唑病抗原Elisa
里亞氏須腹 N,N'-二[2-(二苯基膦基)亞芐基]乙二脯Elisa
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