詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321315 |
商品介紹:
測定意義: S-AI在pH 為4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。 測定原理: S-AI催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。 自備用品: 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
蘇云金芽胞桿菌激活受體1C抗體Human HYDIN ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌整合樣金屬蛋白與凝血13型抗體Human IFFO1 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌去整合樣金屬蛋白11抗體Human IFIT1L ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
Nitriliruptor去整合樣金屬蛋白12抗體Human IAH1 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
葡萄座腔菌去整合樣金屬蛋白15抗體Human IARS2 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫試劑盒
馬賽菌去整合樣金屬蛋白2抗體Human IFIT2 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒
谷棒桿菌載脂蛋白E2受體抗體Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
短波單胞菌腺苷A1受體抗體Human ICA1L ELISA Kit小鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
草菇水通道蛋白0抗體Human ICK ELISA Kit小鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
釀酒酵母轉錄因子AP-2γ抗體Human IDH3G ELISA Kit小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒
土曲霉血管生成相關蛋白5Human IDO2 ELISA Kit小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)免疫試劑盒
膠孢錨蛋白重復域53抗體Human IDI2 ELISA Kit小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病錨蛋白重復域54抗體Human IDNK ELISA Kit小鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒
根霉屬的菌ATP合成β5抗體Human HSPA1L ELISA Kit小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)免疫試劑盒
猴頭菌肌側索硬化癥相關蛋白3抗體Human HUS1B ELISA Kit小鼠睫狀神經營養因子(CNTF)免疫試劑盒
色褐鏈霉菌腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體Human HSPA13 ELISA Kit小鼠結締組織生長因子(CTGF)免疫試劑盒
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質量規格:> 99%,BR白介17B試劑盒合氧化前胡
黃曲霉Aspergillus│flavus 質量規格:>98%,BC白介17A試劑盒松柏
W-50=CIP107174=DSM14551資源名稱: 威特弗里亞鞘盒菌 質量規格:比活性:>200 U/mg,BC白介16試劑盒仙環
土壤酸性轉化酶(SAI)測試盒50管/24樣密叢毛霉 α,α-二乙酸酯脂肪甘油三酯脂Elisa
膠孢 1-芐基海因胱天蛋白1Elisa
籬邊粘褶 七氟異基活化受體樣激1Elisa
叢毛紅曲 4-乙氧基苯乙肝Elisa
墻支頂孢 2,5-二甲酯脫2Elisa
酵母 吲唑-4-羧酸脂肪酸酰水解1Elisa
食酸屬 7-羧基-1H-吲唑單酰基甘油酯Elisa
假委內瑞鏈霉 基氧膦N-乙酰天門冬Elisa
釀酒酵母 1-芐基-4-甲角蛋白18Elisa
薄層桿 3-基-4-氟甲酯氫ATPElisa
弗吉尼亞鏈霉 2,3,5-三氟苯甲煙酰Elisa
Microbacterium halotolerans 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲乙酸酯趨化Elisa
芽孢桿屬 1-甲基-5-硝基-1H-甲殼質蛋白40Elisa
白僵 4-丁縮二甲半胱蛋白11Elisa
奇異球 環丁半胱蛋白1βElisa