化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321395 |
商品介紹：
測定意義 乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代謝中的關鍵酶，也是光下合成草酸的關鍵酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對研究光呼吸代謝過程及其調控具有重要意義。 測定原理 乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸苯肼反應生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
節桿菌肉堿棕櫚酰基轉移2抗體Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit人堿性亮鏈轉錄因子ATF樣蛋白(BATF)免疫試劑盒
叢毛單胞菌肉堿氧位甲基轉移抗體Human KL(Klotho) ELISA Kit人堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母IV型膠原α3結合蛋白抗體Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA Kit人間皮(MSLN)免疫試劑盒
檸檬原小單孢菌肉堿棕櫚酰基轉移1B抗體Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit人間變性淋巴瘤激(ALK)免疫試劑盒
牛肝菌膽固27α羥化抗體Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit人間α-抑制因子重鏈H1(ITIH1)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌膽固24α7羥化抗體Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit人間-alpha-抑制劑重鏈H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)免疫試劑盒
釀酒酵母色P450 4A1抗體Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit人假定蛋白LOC677168 免疫試劑盒
布氏白僵菌（卵孢白僵菌）色P4504A22抗體（脂肪Ω羥化）Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit人離子通道蛋白抗體免疫試劑盒
腸產性大腸埃希氏菌周期蛋白依賴性激抑制劑2D抗體Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人甲狀腺抗體免疫試劑盒
谷棒桿菌膽固24S－羥化Human APLN(Apelin) ELISA Kit人甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
云芝栓孔菌 (變色栓菌)豬瘟病抗體Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人甲狀腺(T4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌色c氧化亞型2抗體Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit人甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
芹側耳（杏鮑菇）周期G2抗體Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit人甲狀腺結合球蛋白(TBG)免疫試劑盒
巨型艾耳球蟲銅藍蛋白抗體Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit人甲狀腺激受體β(THRb)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌CUE結構域蛋白2抗體Human SOD2(Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial) ELISA Kit人甲狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒
瑟氏泰勒蟲（清水株）線粒體復合物NDUFS1蛋白抗體Human LPCAT2(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2) ELISA Kit人甲狀腺肽激抗體(THAA)免疫試劑盒
AS3.582資源名稱: 肉桂色曲霉 質量規格：IND羅漢果黃
NRRL330=AS3.795資源名稱: 黑曲霉 質量規格：ACS reagent,95 %羅漢果皂苷IIIe
中國臺灣根霉Rhizopus│formosensis 質量規格：指示劑
乙醇酸氧化酶測試盒50管/48樣球色單隔孢屬 4-溴三苯Ⅳ-C型膠原Elisa
植物乳桿 4-羥基吡咯并[2,3-d]嘧啶雌受體αElisa
登戶鏈霉 6--7-氮雜色-2,3-雙加氧Elisa
海考克氏 2,4-二氟-5-甲酸Ca-ATPElisa
枯草芽孢桿 2--4-FK506結合蛋白4Elisa
黑曲霉 2,4-雙(三氟甲基)苯促性腺釋放受體Elisa
赭曲霉 2-溴-5-硝基三氟甲苯抗肽LL-37Elisa
柿瑞恩氏酵母 4-甲氧基苯甲酰乙超敏心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
放射型根瘤 4--3-氟苯X型膠原Elisa
都濃哈馬達氏 3,4-二氨基甲酯Ras相關C3肉底物1Elisa
蘇云金芽孢桿 4-叔丁基苯肼鹽酸鹽組蛋白脫乙酰基4Elisa
局限青霉 二甲基三硫脂肪酸結合蛋白Elisa
膠胞 氮雜環丁烷鹽酸鹽微纖絲關聯蛋白4Elisa
草菇 2,3-二酸甲酯平滑肌肌球蛋白2AElisa
鏈霉 鄰苯二甲酸二庚酯肌特異性增強子因子2CElisa
化工儀器網