詳細介紹
商品介紹:
商品介紹 測定意義 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質細胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,可促進脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆粒可導致LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發生。 測定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產生α-萘酚,可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內與肝酯酶活性成正相關。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。 |
公司產品僅供科研使用:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
微量法 | 100管/48樣 | AS6321186 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產品優點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩定性好:批內CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
腎茶(標準品)英文名: N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochlorideG基丁受體3抗體包裝100mg
升麻(興安升麻)(標準品)英文名: N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl esterG基丁受體α3抗體包裝500mg
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標準品)英文名: AEBSF HClGEN1蛋白抗體包裝10MG
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: AEBSF HCl谷酰磷核糖基焦磷酰基轉移包裝25g
升麻(標準品)英文名: Bestatin HClα-半乳糖苷抗體包裝5g
升麻苷(標準品)英文名: 1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate蛋白偶聯受體55抗體包裝1g
升麻-3-O-α-L-伯糖苷(標準品)英文名: Phosphoramidon disodium salt生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ包裝25g
生脈提取物(標準品)英文名: Decyl β-D-glucopyranoside 生長停滯特異性蛋白2家族3抗體包裝5g
勝紅薊(標準品)英文名: Dolutegravir,GSK1349572顆粒K抗體包裝1g
圣草次苷(標準品)英文名: Dodecyl glucopyranoside甘油磷二酯磷結構域5抗體包裝25g
圣草(標準品)英文名: Hydroxyethyl Celluloseγ谷酰轉移抗體包裝5g
蓍草(標準品)英文名: Hydroxyethyl CelluloseG1基丁A型受體α1抗體包裝250mg
十七碳酯(標準品)英文名: Hydroxyethyl Cellulose谷脫羧-65抗體包裝100g
石菖蒲(標準品)英文名: Isopropyl β-D-thiogalactoside谷脫羧-65抗體(C端)包裝25g
石吊蘭(標準品)英文名: D-Mannose半乳糖凝集3抗體包裝5g
地下節桿菌Arthrobacter│subterraneus 質量規格:含量測定內皮抑試劑盒羅紅霉;Roxithromycin
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規格:>99%,USP,可用于培養內皮型一氧化氮合成試劑盒吉堿;Wilforgine
葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質量規格:含量測定內皮特異分子-1試劑盒次堿;Wilforine
肝脂酶(HL)測試盒100管/48樣傷口埃希氏 乙酰唑轉化生長因子P1Elisa
構巢裸胞殼 2-(trifluoromethyl)benzenecarbothioamide乙脫氫1家族成員A2Elisa
短小克銀漢霉 環酸神經生長因子前體Elisa
嗜酸乳桿 3,5-雙(三氟甲基)苯肼乙脫氫1家族成員A2Elisa
坎氏弧 二甲基二酸抗核IgA抗體Elisa
短裙竹蓀1-4 (+)-苯并四咪唑抗核IgM抗體Elisa
戊糖乳桿 5--2-戊酮缺氧誘導因子1αElisa
蘇云金芽孢桿東北亞種 仲丁基酸食道癌相關基因4Elisa
卵形孢霉屬 Boc-(S)-3-甲酸溶血酰基轉移Elisa
皺褶假絲酵母 2-氟-4-甲氧基藍氏賈弟鞭毛蟲IGG抗體Elisa
暗黑微綠鏈霉 2-(2,4,5-Trifluorophenyl)ethanol20-a羥基孕酮Elisa
土地叢毛單胞 4-硝基-3-(三氟甲基)H5N1-IgG抗體Elisa
粉狀畢赤酵母 三氟磺酸鉍H5N1-IgM抗體Elisa
麥根腐平臍蠕孢 氨地平KH型剪接調節蛋白Elisa
解烴棒桿 5-溴-2-吡啶甲星狀病IGM抗體Elisa