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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321186 |
商品介紹：
測定意義 肝酯酶是脂肪分解酶，在肝實質(zhì)細(xì)胞中合成，存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面，可促進(jìn)脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉(zhuǎn)化，血漿中的HL活性增高時，血漿中小顆粒可導(dǎo)致LDL水平升高，加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。 測定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚，可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物，在595nm有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
石吊蘭英文名： D-Mannose神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43包裝1g
石斛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： N-Octanoyl-N-methylglucamine3-磷甘油脫氫（兔來源免疫組化用抗體）包裝5g
石斛堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： N-Decanoyl-N-methylglucamine 3-磷甘油脫氫單克抗體(內(nèi)參抗體)包裝1g
石見穿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside生長停滯特異性蛋白2家族1抗體包裝5g
石椒草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： D(+)-Raffinose pentahydrateG蛋白偶聯(lián)受體97抗體包裝1g
石榴皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： D-SorbitolG蛋白結(jié)合蛋白7抗體包裝250mg
石榴皮鞣；安石榴林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： N-Octyl-β-D-glucopyranoside綠色熒光蛋白抗體包裝25g
石榴子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-(+)-Ribose綠色熒光蛋白抗體包裝5g
石杉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-(+)-RiboseG蛋白通路抑制蛋白1抗體包裝1g
矢車菊-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 2-Deoxy-L-ribose膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體包裝5g
使君子（使君子仁）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews核突觸蛋白-γ抗體包裝1g
首烏藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 2-Deoxy-D-Ribose粒-巨噬克激因子抗體包裝5g
熟地黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： D-Galactose還原抗體包裝5ml
鼠尾草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： D-Galactose胰高血糖樣肽-1抗體包裝1g
鼠尾草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Hydrazine dihydrochloride顆粒蛋白前體抗體包裝25g
繩索狀芽孢桿菌Bacillus│funiculus 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR內(nèi)皮2試劑盒絡(luò)石苷;Tracheloside
魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)皮1受體試劑盒莨菪堿;L-Hyoscyamine
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR內(nèi)皮1試劑盒鐮葉芹二;Falcarindiol
肝脂酶（HL）測試盒50管/24樣Fusarium venenatum Nirenberg N-乙烯基吡咯烷酮肌腱蛋白NElisa
短小芽孢桿 2-乙基丁酸肌腱蛋白XElisa
草木樨中華根瘤 trans-N-tert-Butyloxycarbonyl-4-tosyloxy-L-proline神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白BElisa
光滑青霉 六Taperin蛋白Elisa
蜂房哈夫尼 2-甲基-3-(三氟甲基)苯甲Talpid3蛋白Elisa
豌豆根瘤 2,5-二氫-6-羥基-2-甲基-5-氧-3-巰基-1,2,4-三新城疫病sIgA抗體Elisa
香菇 5-溴-3-甲幾丁質(zhì)Elisa
孟氏假單胞 4-基苯乙鎖鏈Elisa
麥根腐平臍蠕孢 1-溴-3-苯氧基烷基質(zhì)金屬蛋白抑制因子9Elisa
灰葡萄孢* (1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基環(huán)己烷-1,2-二Tsukushin蛋白Elisa
球孢白僵 間苯甲萊姆病抗體Elisa
克魯斯假絲酵母 4,5-二氟-2-萊姆病IgM抗體Elisa
桑炭疽盤 3-溴-5-氟-4-甲氧基苯高遷移率族AT Hook蛋白2Elisa
乳酸乳球乳亞種 4-乙酰基脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白2Elisa
粉擬青霉 3-甲氧基溴芐Notch同源物3Elisa
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