詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是體內能量的主要來源。血清甘油三酯/三酰甘油(TG)是一項重要的臨床血脂常規測定指標,特別是隨著對其致動脈粥樣硬化(AS)作用研究的深入,TG作為冠心病的一項獨立的危險因素日益受到重視。測定原理血清中加入異丙醇抽提取甘油三酯,經KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸,甘油在過碘酸作用下氧化成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色的3,5二乙酰,1,4二氫甲基吡啶,其顏色的深淺與甘油三酯的含量成正比。實驗中所需儀器及設備可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321187 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
牛角粉(標準品)英文名: Laminarin from Laminaria digitataγ-谷酰轉肽5輕鏈抗體包裝5g
翁花(標準品)英文名: Pancreatinγ-谷酰轉肽7輕鏈抗體包裝50mg
仙苷(標準品)英文名: Papain溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體包裝1g
楊苷(標準品)英文名: Papain糖原合激3α+β抗體包裝5g
楊梅根(標準品)英文名: PancreatinG2期/S期應答相關蛋白1抗體包裝25g
楊酯(標準品)英文名: Pancreatin生長分化因子8/肌肉抑制抗體包裝5g
蛭(螞蟥)(標準品)英文名: Orphenadrine citrate磷化糖原合激3α/β抗體包裝25g
絲瓜甙B英文名: β-GalactosidaseSEC63域內含蛋白1抗體包裝5g
絲石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖酯英文名: Abscisic acid,S-ABAA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
斯皮諾(標準品)英文名: Abscisic acid,S-ABA人類狀瘤病33 E6蛋白抗體包裝5g
四氫小檗堿(標準品)英文名: Abscisic acid,S-ABABeta基己糖苷beta亞基蛋白A鏈抗體包裝10MG
四氫鴨腳木堿英文名: PEPSIN磷化熱休克蛋白-70抗體包裝100g
松柏;4-羥基-3-氧基肉桂(標準品)英文名: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化熱休克蛋白-70抗體包裝25g
松果菊苷(標準品)英文名: Andarine19號染色體開放閱讀框38抗體包裝5g
松苓新英文名: PEPSIN乙酰肝抗體包裝10mg
光滑假絲酵母Candida│glabrata 質量規格:>97%,BR末端補體復合物C5b-9試劑盒內酯;Triptolide,14
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質量規格:HPLC>97%,標準品膜內酰基肽試劑盒路路通;Liquidambaric a
雷夫松氏菌Leifsonia│sp. 質量規格:>95%,蛋白≤0.1%膜聯蛋白A2試劑盒靈-B;(-)-Licarin B
甘油三酯(TG)含量測試盒50管/48樣硬結節桿 4-甲基鄰苯二白關聯球蛋白樣受體1Elisa
鞘氨 4-氟-2-甲白關聯球蛋白樣受體2Elisa
*灰葡萄孢 甘油縮甲γ谷氨酰轉移Elisa
糞腸球 3-溴-5-甲酸甲酯(易)酪激受體BElisa
毛霉屬 環戊基苯酸β位淀粉樣前體蛋白裂解2Elisa
弓形蟲(GJS-3株) 鹽酸特唑磷酸化蛋白激C亞性D型Elisa
北京擲孢酵母 2-甲氧基-6-突觸核蛋白βElisa
蓋替隱球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮豐富重復G蛋白偶聯受體5Elisa
淺灰小雙孢 1-(4-吡啶基)酮激錨定蛋白4Elisa
廣西腐霉 3-氨基-2-吡啶緊密連接蛋白4Elisa
黑曲霉 4-環己酮羧酸甲酯可溶性Klotho蛋白Elisa
空腸彎曲桿 5--1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不飽和脂肪酸Elisa
近緣毛殼 3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐飽和脂肪酸Elisa
鞘氨桿 1,7-二-4-氧雜庚烷人可溶性EndoglinElisa
釀酒酵母 5-香草酸蛋白激D2Elisa