詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義: 肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在于線粒體內膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從酰基fu酶A將酰基轉移至L-肉毒堿的反應,在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。 測定原理: 基于肉堿和脂酰fu酶A在丙二酰fu酶A存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用,產生脂酰肉堿,并釋放出巰基fu酶A(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應后,產生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321201 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
伊貝母(新疆貝母)(標準品)英文名: D-Methionine人乙型肝炎核心抗原單克抗體包裝25g
乙酰丁香英文名: Sofosbuvir (GS-7977)磷化熱休克蛋白27抗體包裝5g
乙酰杠柳寡糖C英文名: D-Ornithine monohydrochloride聚組抗體g標簽抗體(C端)包裝25g
乙酰哈巴苷(標準品)英文名: H-D-Phe-OtBu.HCI磷化組蛋白H1,4樣蛋白抗體包裝5g
乙酰化白藜蘆(標準品)英文名: D-ProlineHER2受體抗體包裝1g
乙酰黃芪皂苷I英文名: Cefathiamidine環化核苷調控陽離子通道蛋白亞型4包裝25g
乙酰升麻-3-O-α-L-阿伯糖苷英文名: H-D-Ser-OHHEAT重復內含蛋白8蛋白抗體包裝5g
乙酰紫草英文名: D-Serine methyl ester hydrochloride 雄激調節樣蛋白抗體包裝1g
乙酰紫堇靈(標準品)英文名: H-D-Thr-OH雄激調節蛋白2抗體包裝5g
異阿魏(標準品)英文名: D-Tryptophan methyl ester hydrochloride角化蛋白S100A18抗體包裝250mg
異貝殼杉烯英文名: N-Acetyl-D-tryptophan 型肝炎病NS4B抗體包裝25g
異補骨脂查爾;補骨脂乙(標準品)英文名: H-D-Tyr-OMe·HCl異質性核糖核蛋白C1/C2抗體包裝5g
異補骨脂二氫黃(標準品)英文名: 2'-O-Methyladenosine異質性核糖核蛋白R包裝5g
異補骨脂色烯查耳英文名: D-Valine同源相互作用蛋白激4抗體包裝1g
異補骨脂(標準品)英文名: 2'-Deoxy-3'-guanylic acid disodium salt肝輔助因子II抗體包裝5g
保加亞乳桿菌Lactobacillus│bulgaricus 質量規格:>98%,BR硫氧還蛋白還原試劑盒杠柳苷;Periplocin
紅色擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質量規格:HPLC>98%,標準品硫氧還蛋白,線粒體試劑盒款冬;Tussilagone
產黃青霉Penicillium│chrysogenum 質量規格:>99%,S構型硫氧化還原蛋白試劑盒科羅索;Corosolic acid
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)測試盒50管/48樣產黃青霉 雙甜菜堿Elisa
細纖芽孢桿 四丁基氟化,三水甜菜堿脫氫Elisa
釀酒酵母 黃芪黃酮褪黑Elisa
孟氏假單胞 1--4-乙炔基苯脫鎂螯合Elisa
枯草芽孢桿 乙二水楊酸酯脫鎂葉綠a氧化Elisa
亨氏柄桿 3-溴噻吩脫水Elisa
冬蟲夏草 3-羥酸維生B1Elisa
產黃青霉 6-異氧基吡啶-3-酸頻哪酯維生B12Elisa
釀酒酵母 芐基酸頻哪酯維生B2Elisa
暗黃紫鏈霉 4-(1-萘基)苯酸維生B6Elisa
白綠色球形孢囊 8-喹啉羧酸維生CElisa
豇豆慢生根瘤 1-萘甲酸維生EElisa
梭 甲鋰維生K2Elisa
枯草芽孢桿 N-乙基咔唑分裂Elisa
節桿 (R)-(-)-3-羥基四纖維Elisa