化工儀器網
詳細介紹
產品分類：染色其他
儲存條件：室溫,12個月
用途：抗酸染色
注意事項：主要由堿性品紅、乙醇組成。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
堿性品紅乙醇溶液 | 100ml | FS-R7170 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
假單胞菌EHM2蛋白抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) ELISA KIT犬胰島原(PI)免疫試劑盒
雅致小克銀漢霉磷化真核翻譯起始因子4E抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA KIT犬胰島樣因子3(INSL3)免疫試劑盒
假單胞菌屬翻譯延伸因子EF-1a抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT犬胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)免疫試劑盒
殼二胞屬磷化雌激受體α抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) ELISA Kit犬胰島樣生長因子II(IGF2)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT犬胰島樣生長因子1(IGF1)免疫試劑盒
蒼白桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT犬胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
異常漢遜酵母磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) ELISA KIT犬胰島(INS)免疫試劑盒
猴頭酪蛋白激受體B4抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) ELISA KIT犬原激活肽(TAP)免疫試劑盒
亮白曲霉酪蛋白激A5受體抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) ELISA KIT犬原-1 免疫試劑盒
孢絲蓋傘上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA KIT犬(trypsin)免疫試劑盒
橄欖色鏈霉菌癌基因ETS2抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) ELISA Kit犬一氧化氮(NO)免疫試劑盒
側耳內皮3抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) ELISA KIT犬葉(FA)免疫試劑盒
華麗側耳（佛羅里達側耳）磷化外信號調節激5抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT犬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒
滑菇磷化外信號調節激5抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT犬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
野梧桐歐文氏菌外信號調節激4抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT犬血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
松口蘑腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體Human HNRNPM (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) ELISA KIT犬血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：分析標準品,99%L-半胱
: A410資源名稱: 天門冬紫鏈霉菌 質量規格：分析標準品,99.5%維生A
: K86/39資源名稱: 新不倫瑞克沙門氏菌 質量規格：分析標準品,97%羊藿次苷I
堿性品紅乙醇溶液Human major histocompatibility complex I ,MHC I /HLA I ELISA Kit 人主要組織相容性復合體Ⅰ類規格： 48T
Human Thrombin III ,AT- III ELISA Kit 人抗凝血meiⅢ規格： 48T
Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 人血栓前體蛋白規格： 48T
Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 人淋巴細胞功能相關抗原3規格： 48T
Human major histocompatibility complex III ,MHC III /HLA- III ELISA Kit 人主要組織相容性復合體Ⅲ類規格： 48T
化工儀器網