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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321227 |
商品介紹：
測定意義： THL（EC 3.2.1.28）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應。 測定原理： 采用3.5－二硝基水楊酸法測定THL催化海藻糖產(chǎn)生的還原糖的含量。還原糖與3.5－二硝基水楊酸共熱生成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比，由此判斷THL活性的高低。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
發(fā)酵冬蟲夏草菌粉（標準品）英文名： Sotalol HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝1g
法篳枝苷英文名： H-89 2HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝5g
法林二英文名： Fusidine磷化組蛋白去基化JMJD2B抗體包裝1g
番茄苷英文名： Fusidine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白2抗體包裝25g
番茄紅（標準品）英文名： 3-Iodo-L-tyrosine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白3抗體包裝5g
番茄堿（標準品）英文名： Dess-Martin periodinane磷化基末端激1/2/3抗體包裝1g
番石榴苷（標準品）英文名： Cidofovir磷化蛋白質酪激JAK-1抗體包裝25g
番石榴葉（標準品）英文名： 5-Amino-4-imidazolecarboxamide基末端激2抗體包裝5g
番瀉苷A（標準品）英文名： AGM-1470 連接介導調節(jié)蛋白抗體包裝5MG
番瀉苷B（標準品）英文名： Sodium taurolithocholate基末端激3抗體包裝50MG
番瀉苷C（標準品）英文名： glycochenodeoxycholic acid (GCDCA）磷化活化蛋白激B抗體包裝100g
番瀉苷D（標準品）英文名： Sodium taurohyodeoxycholate hydrateJmjC結構域組蛋白去基化H3-K36抗體包裝500g
番瀉葉（標準品）英文名： Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)組蛋白去基化JARID2抗體包裝5g
翻白草（標準品）英文名： ValinomycinJAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）包裝100g
反式茴香腦英文名： 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole活化蛋白激B抗體包裝25g
隔指孢Dactylella│sp. 質量規(guī)格：>99%,BR抗著絲點抗體試劑盒甘草二;Dipotassium gl
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：含量≥99.0%(HPLC)抗轉谷酰抗體試劑盒戈米辛J;Gomisin J
孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標準品抗轉谷酰抗體試劑盒瓜;L(+)-Citrulline
海藻糖酶測試盒100管/48樣黑曲霉 2-羥基-4-甲基嘧啶鹽酸鹽藍莓休克病Elisa
釀酒酵母 2-氨基芐NADH脫氫Elisa
燕麥鐮孢 2-氨基苯乙線條病Elisa
釀酒酵母 草酸鋰藍莓枯焦病Elisa
厚環(huán)乳牛肝 4'-酮藍莓帶化病Elisa
拜耳接合酵母 3-甲基四氫苯酐藍莓葉條紋病Elisa
米根霉 吡啶-4-烯酸草莓潛隱環(huán)斑病Elisa
多育曲霉 2-溴番茄環(huán)斑病Elisa
布魯氏 生物Ⅰ型 4-溴-2-環(huán)斑病Elisa
香菇 2-溴對苯二花葉病Elisa
假單胞 2-甲基環(huán)已酸Elisa
約氏乳桿 四甲基碳酸氫P選擇Elisa
產(chǎn)單核李氏桿 6,7-二氫-5H-環(huán)戊烷并[b]吡啶莽草酸脫氫Elisa
平菇 3-硝基-4-酪解氨Elisa
灰葡萄孢 酸-1-異丁酯磷酸甘油酸激Elisa
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