LB培養基粉劑公司正在銷售的產品：兔核因子κB抑制蛋白α(IκBα)試劑盒Anti-CCNB2 Antibody原鈣粘蛋白γB6抗體
兔纖溶酶-抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒Anti-CCNB2 Antibody原鈣粘蛋白γC3抗體
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兔3-羥基-3-甲基戊二酰A合酶1(HMGCS1)試劑盒 An

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產品分類：培養基

儲存條件  室溫,24個月

用途  zui經典、zui通用的細菌培養用液體培養基,不含瓊脂，本配方為LB Miller的配方。leagene推薦用于大腸桿菌培養。

注意事項  主要由酵母提取物、胰蛋白胨、氯化鈉等組成,不含瓊脂，如要求無菌,可高壓滅菌15～20min。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

白細胞介16(IL-16)IL-16 ELISA KitB淋巴成熟因子抗體包裝5g

白細胞介13(IL-13)IL-13 ELISA Kit促凋亡Bik蛋白抗體包裝1g

白細胞介12(IL-12/P70)IL-12/P70 ELISA Kit癌抑癌蛋白抗體包裝25g

白細胞介12(IL-12/P40)IL-12/P40 ELISA Kit癌易感基因環狀結構域蛋白抗體包裝5g

白細胞介10(IL-10)IL-10 ELISA Kit癌相關抗原BRCAA1抗體包裝25g

白細胞分化抗原配體40(CD40/TNFRSF5)CD40/TNFRSF5 ELISA Kit腦組織表達X連鎖蛋白1抗體包裝5g

白細胞分化抗原30配體(CD30L)CD30L ELISA KitB淋巴連接蛋白抗體包裝25g

白介21(IL-21)IL-21 ELISA Kit磷化T淋巴連接蛋白抗體包裝5g

白介1受體拮抗劑(IL-1RA)IL-1RA ELISA KitBcr抗體包裝1g

白介1β(IL-1B)IL-1B ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝5g

白介17(IL-17)IL-17 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5mg

白介12(IL-12/P70)IL-12/P70 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝25g

白介12(IL-12/P40)IL-12/P40 ELISA Kit磷化T淋巴受體抗體包裝5g

L選擇(SELL)SELL ELISA Kit骨架銜接蛋白BIN3抗體包裝1g

E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)E-Cadherin/CDH1/CD324 ELISA Kit雙向染色體分裂蛋白1抗體包裝250mg

性磷樣蛋白2抗體干擾α17(IFNα17)LDN193189 是一種選擇性的 BMP I 型受體抑制劑，抑制 ALK2 和 ALK3 的 IC50 分別為 5 nM 和 30 nM。對 ALK4，ALK
LB培養基粉劑ET-1/HRP  辣根過氧化物標記內皮-1單克隆IgG3,4,5-氧苯 98%

ETK/BMX/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠非受體性蛋白酪氨激ETKIgG1，3，5-氧苯 98%

Phospho-ETK (Tyr40) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化非受體性蛋白酪氨激ETKIgG3,4,5-氧苯 98%

E Tag/FITC  熒光標記抗E TagIgG2,4,5-氧苯 98%

ets1/E26 /FITC  熒光標記Ets轉錄因子家族ets1IgG葡聚糖70 分子量 70000

Eukaryotic aspartyl protease/FITC  熒光標記天冬氨蛋白家族蛋白IgG葡聚糖40 分子量40000

EV71/FITC  熒光標記腸道病71型/手足口病病IgG葡聚糖20 分子量20000

EV71(CT)/FITC  熒光標記腸道病71型/手足口病病(C端)IgG鹽土霉 95%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。