耐酸性α-淀粉酶發酵培養基公司正在銷售的產品：兔胸腺肽β10(TMSβ10)試劑盒Anti-CYP27A1 Antibody抑癌基因Rbms3抗體
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兔抗磷脂抗體(APA)試劑盒 Anti-CYP27A1 Antibody質內的糖基化蛋白抗體
兔絲蛋白酶12(PRSS12)試劑盒Anti-CYP

產品分類：培養基

儲存條件  4℃,6個月

用途  多用于黑曲霉培養進而產生α-淀粉酶

注意事項  無菌溶液。主要由1.5%可溶性淀粉、1.5%蔗糖、0.3%磷酸二氫鈉、0.01%氯化鈣、0.01%硫酸鐵等組成，亦含有硫酸鎂、檸檬酸氫二銨等，一般pH值為5.0，經15psi高壓滅菌20min

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

α-胞襯蛋白(SPTAN1)SPTAN1 ELISA Kit鈣連蛋白抗體包裝500g

α白蛋白(AFM)AFM ELISA Kit二氫嘧啶相關蛋白2抗體包裝50mg

α2-纖溶抑制因子(α2PI)α2PI ELISA Kit色P450ⅡE1抗體包裝1g

α2-巨球蛋白(α2M)α2M ELISA Kit趨化因子受體1抗體包裝100g

α2-HS糖蛋白(αHSG)αHSG ELISA Kit磷化原癌基因c-Raf抗體包裝25g

α1-微球蛋白(α1M)α1M ELISA Kit磷化致癌基因C-Myc抗體包裝500g

α1-性糖蛋白(α1AGP)α1AGP ELISA KitCD33抗體包裝1g

α1-抗(α1AT)α1AT ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

Zeste同源物增強子1(EZH1)EZH1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g

YY肽(PYY)PYY ELISA Kit離子通道蛋白3抗體包裝25g

X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)XRCC6 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝5g

X-射線修復交叉互補蛋白5(XRCC5)XRCC5 ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg

X-框結合蛋白1(XBP1)XBP1 ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝1g

Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)WFS1 ELISA Kit磷化Connexin 43蛋白抗體包裝5g

WNT1誘導信號通道蛋白1(WISP1)WISP1 ELISA Kit絲切蛋白抗體包裝100g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：純度98%以上異質性胞核核糖核蛋白G試劑盒乙酰纈草三酯;Acevaltratum

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：>99%,BR異質性胞核核糖核蛋白E試劑盒乙酰哈巴苷;8-O-Acetylharp

CGMCC1.5361=JCM14000資源名稱: 黃微球菌 質量規格：含量測定異質性胞核核糖核蛋白D試劑盒異型南五味子丁;Heterocliti
耐酸性α-淀粉酶發酵培養基Integrin Alpha3/FITC  熒光標記整合α3IgG硅烷 >98.0%(GC)

Integrin Alpha3 Beta1/FITC  熒光標記整合α3β1IgG鄰 AR,98%

Integrin a7/FITC  熒光標記整合α7IgG間 CP

Integrin AlphaE2/CD3 /FITC  熒光標記整合αE2IgG鄰苯二 AR,99.0%

Integrin alpha E2 /FITC  熒光標記整合alpha E2 IgG鄰苯二 CP,98.0%

Integrin AlphaM/CD11b /FITC  熒光標記巨噬表面分子/整合-α2IgG鄰苯二 standard for GC, ≥99.5% (GC)

Integrin avb3/FITC  熒光標記整合avb3IgG2,6-二 99%

Integrin AlphaV Beta5/FITC  熒光標記整合αVβ5IgG2,6-二